产品概述
本试剂盒专用于环纹背带线虫（Teladorsagia circumcincta）的快速、高特异性荧光定量PCR检测，采用染料法（如SYBR Green）实时监测扩增过程。适用于科研、临床及兽医领域对线虫DNA的定性与定量分析。
产品名称
环纹背带线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Teladorsagia circumcincta Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3354
产品组成
预混PCR试剂：含优化缓冲液、dNTPs、热启动Taq DNA聚合酶及荧光染料。
引物对：针对环纹背带线虫特异性基因设计，预期产物长度560 bp。
阳性对照：含靶基因片段的标准品。
阴性对照：无核酸酶水。
实验流程
样本制备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制（50 μL体系）：
预混试剂：25 μL
模板DNA：5 μL
引物：各1 μL（终浓度0.2 μM）
无核酸酶水：补至50 μL
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 30秒 → 60℃ 30秒 → 72℃ 30秒
熔解曲线分析：65℃~95℃，每0.5℃递增
数据分析
定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算待测样本浓度。
定性判定：
阳性：Ct≤35，且扩增曲线呈典型指数增长。
阴性：Ct≥40或无扩增。
可疑（Ct 35~40）：需重复检测，若Ct仍<40判为阳性。
注意事项
操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。
试剂保存于2~8℃，避免反复冻融。
熔解曲线需呈现单一峰以确保特异性。
建议使用ROX染料校正孔间荧光偏差（视仪器需求）。
性能参数
灵敏度：可检测低至1拷贝/μL的靶基因。
特异性：不与常见寄生虫（如捻转血矛线虫）发生交叉反应。
保质期：6个月（生产日期见包装）。
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