肉芽肿性曼氏杆菌病染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 肉芽肿性曼氏杆菌病染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Granulomatous Mannheimiosis Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3589 |
产品用途
本试剂盒专用于科研领域，通过荧光定量PCR技术检测肉芽肿性曼氏杆菌的特定DNA序列，适用于环境样本、动物组织或培养物的病原体检测，不可用于临床诊断。
产品特点
高特异性：针对肉芽肿性曼氏杆菌保守序列设计的引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。
即开即用：预混反应体系（含2×qPCR MagicMix、引物混合物等），用户仅需提供DNA模板。
防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。
稳定性强：试剂经优化，重复性良好，适应多种qPCR仪平台。
规格与成分
2×qPCR MagicMix（含DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液及SYBR Green染料）：500 μL/管
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL/管
肉芽肿性曼氏杆菌PCR引物混合物（冻干粉或液体）：100 μL/管
阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL）：50 μL/管
使用说明书：1份
储存条件
-20℃避光保存，避免反复冻融（保质期12个月）。
操作步骤
样本处理：按标准方法提取待测样本DNA，建议使用试剂盒配套稀释液调整模板浓度。
反应体系配制（20 μL/反应）：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：2 μL
DNA模板：2 μL
无核酸酶水：补足至20 μL
PCR程序设置：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃递增
结果分析：通过Ct值及熔解曲线判定样本阳性/阴性，阳性对照需符合预期扩增曲线。
注意事项
实验前严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免污染。
阳性对照需最后加入，并单独使用移液器吸头。
熔解曲线应呈现单一峰，多峰提示非特异性扩增。
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