李斯特菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 李斯特菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Listeria spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3603 |
产品简介
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物和荧光探针靶向李斯特菌属（Listeria spp.）的保守基因序列，实现对食品、环境样本或临床标本中李斯特菌核酸的快速、高灵敏度检测。适用于定性及定量分析，定量线性范围覆盖1E1–1E6拷贝/μL（5个数量级）。
检测原理
扩增原理：反应体系中探针与目标DNA结合后，Taq酶在延伸阶段分解探针释放荧光信号，通过实时监测荧光强度变化生成扩增曲线，判定目标菌是否存在。
染料法特性：采用通用型荧光染料（如FAM通道兼容），适配多数荧光定量PCR仪（如ABI7500、LC480等）。
试剂盒组成
| 组分名称 | 规格 | 主要成分 |
| 2×Probe qPCR MasterMix | 1 mL | 含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等 |
| 李斯特菌通用引物-探针干粉 | 50T | 特异性引物及荧光标记探针 |
| 阳性对照（无传染性） | 30 μL | 1E7拷贝/μL DNA片段 |
| 阴性对照 | 100 μL | 无核酸酶水 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 用于标准品梯度稀释 |
| 使用说明书 | 1份 | 操作流程及注意事项 |
注：需自备样本DNA提取试剂盒、超纯水及离心管等耗材。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：24个月（未开封状态下）。
运输条件：低温干冰运输。
适用仪器
兼容具备FAM荧光通道的实时荧光定量PCR仪，包括但不限于：
ABI 7500
Roche LightCycler 480
Bio-Rad CFX96
其他等效机型
操作流程
样本处理：
使用商品化核酸提取试剂盒提取样本DNA，建议纯化后浓度≥10 ng/μL。
标准品稀释：
阳性对照按10倍梯度稀释（1E1–1E6拷贝/μL），独立操作避免污染。
PCR反应体系配制（20μL/反应）：
2×MasterMix 10 μL
引物-探针混合液 2 μL
模板DNA 2 μL
超纯水补至20 μL
扩增程序：
预变性：95℃ 3 min
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（采集荧光）
性能指标
灵敏度：最低检出限≤10拷贝/反应。
特异性：对单增李斯特菌（L. monocytogenes）及其他李斯特菌属（如L. innocua）均有效，无交叉反应。
重复性：CV值≤5%。
注意事项
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
阳性对照为DNA片段，不含活菌，无需生物安全防护。
若用于定量分析，需同步运行标准曲线。
声明：本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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