小鼠高分子量激肽原(KNG1)ELISA试剂盒
产品简介:
实验原理
试剂盒采用双抗体夹心法。预先包被KNG1捕获抗体的微孔板依次加入标准品和待测样本，样本中的KNG1与固相抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色，颜色深浅与KNG1浓度正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中的KNG1浓度。
英文名称 | Mouse KNG1 ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A116095 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.078ng/mL | 检测范围 | 0.156ng/mL-10ng/mL |
试剂盒组成
预包被抗体的酶标板：用于固相抗体的固定。
标准品：已知浓度的KNG1溶液，用于绘制标准曲线。
生物素标记的检测抗体：与KNG1结合。
HRP标记的链霉亲和素：催化显色反应。
显色底物（TMB）：在HRP作用下显色。
终止液：终止显色反应。
洗涤液：用于洗涤未结合的试剂。
样本稀释液：用于稀释待测样本。
检测范围与灵敏度
检测范围：通常为0.156-10ng/mL或15.63-1000pg/mL。
灵敏度：最低检测浓度为12.8pg/mL或9.38pg/mL。
操作步骤
准备试剂和样本：按说明书准备试剂，处理样本。
加样：将标准品和样本加入酶标板孔中。
温育：在指定温度下孵育，使抗体-抗原充分结合。
洗涤：洗去未结合的试剂，减少背景干扰。
加酶标抗体：加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素。
显色：加入TMB底物，避光孵育显色。
终止反应：加入终止液，终止显色。
读数：使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
计算：根据标准曲线计算样本中的KNG1浓度。
注意事项
样本处理：血清、血浆需离心处理，避免反复冻融。
试剂保存：试剂盒需按说明书保存，避免失效。
操作规范：使用一次性吸头，避免交叉污染；严格按步骤操作，确保结果准确性。
适用范围
本试剂盒适用于科研领域，用于检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及相关生物液体中的KNG1浓度，不适用于临床诊断。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。
操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。
关键字： 小鼠高分子量激肽原 ;KNG1;ELISA试剂盒;
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