产品概述

本试剂盒专用于田鼠分枝杆菌(Mycobacterium microti)的荧光定量PCR检测,采用染料法(如SYBR Green)实现高灵敏度的核酸定量分析。适用于科研领域,不可用于临床诊断。
产品名称 | 田鼠分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mycobacterium microti Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3530 |

产品特点

即开即用:用户仅需提供待测DNA模板,操作便捷。
高特异性:针对田鼠分枝杆菌保守序列设计引物,无交叉反应。
高灵敏度:检测下限可达数百拷贝/反应。
防污染设计:一管式闭盖检测,减少气溶胶污染风险。
稳定可靠:50次20μL反应体系,满足批量检测需求。
规格及组分

| 成分 | 规格/包装 | 备注 |
| 2×qPCR MasterMix | 500 μL(棕色管) | 含荧光染料、dNTPs等 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) | 用于标准品稀释 |
| 田鼠分枝杆菌引物混合物 | 100 μL(白盖) | 特异性引物及探针(若适用)|
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(红盖) | 非活体DNA片段 |
| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |
运输与保存
运输条件:低温运输(-20℃冰袋或干冰)。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
自备试剂
DNA模板(需纯化至OD260/280≈1.8-2.0)。
10×ROX校正染料(依PCR仪器型号选配)。
使用方法

1. 阳性对照稀释(示例:10²~10⁷拷贝/μL梯度)
标记6管离心管(7~2号),每管加45 μL稀释液。
取5 μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)加入7号管,震荡混匀,得1×10⁷拷贝/μL(7号管)。
依次梯度稀释至2号管(1×10²拷贝/μL),每次更换枪头。
2. PCR反应体系(20μL)
| 组分 | 体积(μL) |
| 2×qPCR MasterMix | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| ROX(可选) | 0.4 |
| ddH₂O | 补足至20 |
3. 扩增程序
预变性:95℃ 3分钟;
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40循环,荧光采集);
熔解曲线分析(60~95℃,0.5℃/步)。
注意事项

标准品稀释需在独立区域操作,避免污染。
反应体系配制需在冰上进行,防止酶失活。
熔解曲线单峰为特异性扩增标志,多峰提示非特异性产物。
质量控制
阴性对照:以水代替模板,确认无污染。
阳性对照:Ct值≤30且熔解曲线符合预期。
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关键字: 田鼠分枝杆菌;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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