仙台病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 仙台病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Sendai Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3649 |
产品概述
本试剂盒采用SYBR Green I染料法，专为仙台病毒（Sendai Virus）RNA的高灵敏度、高特异性检测设计。通过一步法实现反转录（RT）与实时荧光定量PCR（qPCR）的整合，避免开盖污染风险，适用于临床样本、细胞培养物或环境样本中的病毒核酸定量分析。
检测原理
反转录阶段：耐热逆转录酶将病毒RNA高效转化为cDNA。
qPCR扩增：UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase在优化缓冲体系中扩增靶标，SYBR Green I嵌入双链DNA后发射荧光信号，通过Ct值定量病毒载量。
产品组分
2× Advanced SG Buffer：含SYBR Green I染料的预混反应液
UH Enzyme Mix：逆转录酶与热启动Taq聚合酶复合物
RNase-free H2O：无核酸酶水
（注：具体组分比例需根据规格选择，如20 T或200 T装量。）
性能参数
灵敏度：可检测低至0.1 pg高表达病毒RNA或单拷贝DNA。
特异性：熔解曲线分析确保扩增产物单一性。
稳定性：预混液4℃保存24小时性能无显著变化。
兼容性：适配主流qPCR仪（No/Low/High Rox平台）。
操作步骤
反应体系配制：按比例混合缓冲液、酶混合物、引物及模板RNA。
程序设置：
反转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 5分钟
qPCR循环：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（信号采集），共40循环
数据分析：
定量：通过标准曲线计算病毒RNA浓度。
定性：Ct值≤35为阳性，≥40为阴性，35-40需复测。
注意事项
保存条件：-20℃长期保存，避免反复冻融；4℃可稳定3个月。
仅限研究用途，不可用于临床诊断。
建议使用无RNase耗材，防止RNA降解。
应用案例
已验证适用于293T细胞总RNA中的病毒靶标检测，扩增效率＞90%，重复性CV＜5%。
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