产品介绍：
小鼠神经生长因子（NGF）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中神经生长因子（NGF）含量的科研工具。该试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，具有高灵敏度和特异性，广泛应用于神经科学、免疫学及疾病机制等相关研究领域。
产品名称 | 小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse NGF ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A105045 |
核心特点
检测原理：采用双抗体夹心法。预包被抗小鼠NGF抗体的微孔板，加入标准品或待测样本，再加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。加入TMB底物显色，颜色深浅与样本中NGF浓度正相关，终止反应后在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。
检测范围：通常为12.5 pg/mL – 400 pg/mL，灵敏度高，最低检测限可达1.0 pg/mL以下。
样本类型：可检测血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆（推荐用PBS清洗并匀浆）、细胞培养上清及其他生物液体。
试剂盒组成：包括预包被抗体的酶标板、标准品、HRP标记检测抗体、TMB显色液、终止液、洗涤液等，组分齐全，部分品牌提供48T和96T规格，可拆卸使用。
保存条件：试剂盒需2-8℃冷藏保存，避免反复冻融和强光照射，有效期约6个月。
操作步骤（简要）
样本准备：血清/血浆/组织匀浆等按说明书稀释，避免溶血和反复冻融。
加样：分别设标准品孔和样本孔，加入相应液体，37℃反应30-60分钟。
洗涤：洗板5次，去除未结合物质。
显色：加入TMB底物，37℃避光显色10-15分钟。
终止与检测：加终止液，酶标仪450 nm读取OD值，根据标准曲线计算浓度。
注意事项
仅限科研使用，不得用于临床诊断或人体治疗。
严格遵守温育时间及洗涤步骤，避免污染和交叉反应。
标准品和样本建议做复孔，提高检测准确性。
不同品牌试剂盒灵敏度和组分可能略有差异，使用前仔细阅读说明书。
试剂与样本准备阶段：
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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