产品介绍:

小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE) ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等生物样本中NSE浓度的科研工具。该试剂盒基于双抗体夹心ELISA法原理,通过特异性抗体识别NSE蛋白,具有高灵敏度和高特异性,广泛应用于神经科学研究、疾病机制探索及药物开发等领域。
产品名称 | 小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse NSE ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A105039 |
核心原理
采用双抗体夹心法:用抗小鼠NSE抗体包被酶标板,样本中的NSE与抗体结合后,加入生物素化检测抗体和HRP标记的亲和素,形成免疫复合物。
显色反应:加入TMB底物后产生蓝色反应,终止液使颜色变为黄色,颜色深浅与NSE浓度呈正相关。
浓度计算:在450 nm波长下测定OD值,通过标准曲线计算样本中NSE的浓度。

主要参数

参数 说明
检测范围 通常为78.13–5000 pg/mL 或 0.5–16 ng/mL(依品牌而异)
灵敏度 最低可检测浓度达46.88 pg/mL
特异性 不与结构类似物发生交叉反应
重复性 板内和板间变异系数均小于10%–15%
样本类型 血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞上清、组织匀浆等
保存条件 2–8°C冷藏保存,未开封试剂盒建议分装后长期保存于-20°C
有效期 一般为6个月至11个月(见具体产品说明)
操作步骤概览

准备:试剂和样本恢复至室温(20–25°C),平衡15–30分钟;
加样:将标准品和待测样本加入预包被抗体的微孔中;
温育与洗涤:37°C孵育一定时间,洗板5次去除未结合物质;
加检测抗体:加入生物素化抗体,再次温育并洗涤;
显色:加入TMB底物,避光显色10–15分钟;
终止与读数:加入终止液后15分钟内于450 nm处测定OD值;
数据分析:绘制标准曲线,代入样本OD值计算浓度。
关键注意事项

不建议反复冻融样本,以防止蛋白降解;样本若需长期保存,建议分装后置于-20°C或更低温度;
不同批次试剂不可混用,避免交叉污染;
实验过程中需设置标准曲线和复孔,确保数据准确性;
试剂盒仅用于科研,不适用于临床诊断。
试剂与样本准备阶段:

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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关键字: 小鼠神经特异性烯醇化酶; NSE;ELISA试剂盒;
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