中肠腺坏死杆状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 中肠腺坏死杆状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Midgut Gland Necrosis Baculovirus (MGNBV) Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3672 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测中肠腺坏死杆状病毒（Baculoviral Midgut Gland Necrosis Type Virus, BMNV）的核酸。适用于对虾等水产样本的科研检测，具有高特异性和灵敏度，可快速鉴别病毒核酸，助力疾病防控研究。
技术特点
高特异性：针对BMNV保守序列设计引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测下限达数百拷贝/反应。
操作简便：一管式反应，用户仅需提供DNA模板。
安全设计：提供非活体DNA片段作为阳性对照，避免生物污染风险。
荧光染料特性：
游离态最大吸收波长：471nm；
DNA结合态最大吸收/发射波长：500nm/530nm。
实验流程
样本准备
对虾组织样本：取中肠腺或肝胰腺组织，液氮研磨后提取DNA。
其他样本：按标准核酸提取方法处理，确保无RNase/DNase污染。
试剂配制
解冻试剂组分，短暂离心混匀。
按反应数配制预混液（含荧光染料、聚合酶、dNTPs等）。
PCR扩增
加样：将预混液分装至反应管，加入模板DNA（建议2μL/反应）。
程序设置：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。
数据分析
阈值循环数（Ct值）≤35判定为阳性，需结合标准曲线进行半定量分析。
注意事项
实验分区操作，避免气溶胶污染。
阳性对照需单独稀释（建议10^2~10^7拷贝/μL梯度）。
反应体系需避光操作，防止荧光淬灭。
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