产品介绍:

检测原理:采用双抗体夹心法,微孔板预包被抗CD40抗体,依次加入标准品/样本和生物素标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物,通过TMB显色,酶标仪测定吸光度,计算样本中CD40浓度。
产品名称 | 小鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员5(CD40)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse CD40 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A115732 |
高灵敏度与特异性:使用高度特异的抗体,避免交叉反应,确保检测结果准确。
严格质检:通过回收率测试和线性稀释实验,控制批间、批内差异,保证数据可靠性。
便捷操作:即开即用,无需抗体包被过夜,节省时间;提供详细的操作步骤和质量控制数据。

适用样本
血清、血浆、细胞培养上清液和组织等。
保存与有效期
保存条件:2-8℃,避免冻结。
有效期:6个月。
操作步骤

加样:设空白孔、标准孔和待测孔,加入样本及试剂。
温育:封板后37℃温育。
洗涤:甩去液体,洗涤液浸泡后拍干。
加酶:加入酶标试剂,温育。
显色:加入显色液,避光显色。
终止:加入终止液终止反应。
测定:酶标仪450nm波长测定吸光度。
注意事项

样本处理:避免反复冻融,按要求保存。
操作规范:严格按说明书操作,避免交叉污染。
结果解读:根据标准曲线计算浓度,注意线性范围。
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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