产品介绍:

大鼠连环蛋白β1(β-catenin)ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠样本中β-catenin浓度的科研试剂盒,广泛应用于血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等生物样本的分析。试剂盒基于双抗体夹心法原理,具有高特异性和灵敏度,检测范围通常为0.156-10ng/mL,部分产品可达到5-240ng/L,可满足不同样本类型的需求。

产品特点

检测原理:采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),预先包被特异性抗体,加入样本和标准品后,再加入HRP标记的检测抗体,通过TMB显色,颜色深浅与样本中的β-catenin浓度呈正相关。
灵敏度高:检测浓度可小于1.0 pg/mL,能够准确检测低浓度样本。
特异性强:不与其它可溶性结构类似物交叉反应,确保检测结果的准确性。
重复性好:板内、板间变异系数均小于15%,保证实验结果的稳定性。
保存条件:试剂盒保存在2-8℃,避光防潮,有效期一般为6个月。
产品名称 | 大鼠连环蛋白β1(β-catenin)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat β-catenin ELISA |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116751 |
样本处理方法

血清:使用不含热原和内毒素的试管收集血液,室温凝固2小时或4℃过夜,离心取上清。
血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,离心取上清。
细胞上清液:离心去除颗粒和聚合物。
组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,离心取上清。
保存:样本如不立即检测,建议分装冻存于-20℃,避免反复冻融。
操作步骤

试剂准备:试剂盒从冷藏环境中取出后,在室温平衡15-30分钟。
加样:设置空白孔、标准孔和样本孔,标准品和样本加样量为50μL,样本孔先加样品稀释液40μL,再加待测样本10μL
温育:用封板膜封板后置于37℃温育30-60分钟。
洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置后甩去,重复洗板5次
加酶:每孔加入酶标试剂50-100μL,空白孔除外。
温育与洗涤:重复温育和洗涤步骤。
显色:每孔加入显色剂A、B各50μL,37℃避光显色10-15分钟
终止:每孔加入终止液50μL,终止反应。
测定:以空白孔调零,450nm波长测定各孔的OD值
数据计算
以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线,根据样本的OD值查出相应的浓度,再乘以稀释倍数,即为样本的实际浓度
注意事项

试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断。
避免反复冻融样本,以免影响检测结果。
严格按照说明书操作,确保实验结果的准确性
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
关键字: 大鼠连环蛋白β1 ;β-catenin;ELISA试剂盒;
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