操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

人源重组真核翻译起始因子4G1(Recombinant Human Eukaryotic Translation Initiation Factor 4 Gamma 1,简称 rhEIF4G1)是一种在蛋白质合成调控、癌症研究及神经科学中具有核心地位的重组蛋白。它对应于人体内的 EIF4G1 基因所编码的蛋白质,是真核翻译起始复合物eIF4F的关键支架蛋白。
产品名 | Recombinant Human EIF4G1 | 分子量 | 60.2 kDa |
表达区间 | 1250-1599 | 货号 | XG-DB1875 |
别名
DKFZp686A1451, eIF 4 gamma 1, eIF 4G 1, eIF 4G1, eIF-4-gamma 1, eIF-4G 1, eIF-4G1, EIF4 gamma, EIF4F, EIF4G, EIF4G1, EIF4GI, Eukaryotic translation initiation factor 4 gamma 1, IF4G1_HUMAN, p220
宿主; E.Coli
表达区间; 1250-1599
分子量; 60.2 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

未分化胚胎干细胞转录因子1 | 组织胶原蛋白(collagen)比色法定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化CREB转录共激活因子TORC2 | 细胞总脂肪酶(lipase)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
FAM蛋白标记试剂盒 | PAR-1蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
动物细胞氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法 | 石蜡切片平滑肌组织染色试剂盒 |
调料激酶法定量pcr检测试剂盒 | β半乳糖苷酶抗体 |
高迁移率族结合蛋白N4 | KIAA1688蛋白抗体 |
载玻片细胞HISTONE H3蛋白表达荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 细胞NAD依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光谱法定量pcr检测试剂盒 |
组织(folic acid)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 细胞培养病毒污染溶斑法中性红染色试剂盒 |
转录因子同源蛋白NKX2.4 | EHBP1蛋白抗体 |
结肠癌相关蛋白Mic1 | 内皮细胞清道夫受体抗体 |
Rab蛋白GTP酶激活蛋白1 | 蛋白激酶C相关激酶1抗体 |
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶(CYP-ECOD)总活性 | Recombinant Human EIF4G1液泡蛋白分选蛋白35抗体 |
AF750标记的磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 | ALKB蛋白抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: EIF4G1;60.2 kDa; 1250-1599;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。