兔胃平滑肌细胞
产品信息:
产品名称 兔胃平滑肌细胞
组织来源 胃组织
种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rabbit Gastric Smooth Muscle Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X2049 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的兔胃平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的兔胃平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:兔胃平滑肌细胞
组织来源:胃组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶兔胃平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
兔胃平滑肌细胞分离自胃组织;胃柔软,活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞,充盈时变平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和浆膜四层构成。粘膜上皮为柱状上皮。上皮向粘膜深部下陷构成大量腺体(胃底腺、贲门腺、幽门腺),它们的分泌物混合形成胃液,对食物进行化学性消化。粘膜在幽门处由于覆盖幽门括约肌的表面而形成环状的皱襞叫幽门瓣。胃肌膜由三层平滑肌构成,外层纵形,中层环形,内层斜行,其中环形肌最发达,在幽门处特别增厚形成幽门括约肌。胃平滑肌细胞源自胃的平滑肌层,细胞通过紧密连接,进行同步性运动,完成肌肉的舒缩活动,以推动食物前进,完成对食物的机械性消化,并促进化学性消化和吸收。胃平滑肌具有肌组织的共同特性,如兴奋、自律性、传导性和收缩性,在离体后,置于适宜的环境内,仍能进行良好的节律性运动,但其收缩很缓慢,节律性远不如心肌规则。胃平滑肌对电刺激较不敏感,但对于牵张、温度和化学刺激则特别敏感,轻微的刺激常可引起强烈的收缩。胃平滑肌的这一特性是与它所处的生理环境分不开的,胃内容物对平滑肌的牵张、温度和化学刺激是引起内容物推进或排空的自然刺激因素。
原代细胞分离:
组织样本处理:取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中,避免样本干燥和温度变化;修剪时去除坏死、结缔组织等杂质,尽量减小组织块体积以提高消化效率。
消化方法选择:
酶消化法:根据组织类型选对应酶(如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织),严格控制消化温度(通常37℃)和时间,每隔5-10分钟镜下观察,避免过度消化损伤细胞。
机械分离法:适合柔软组织(如脑、肝脏),通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞,操作时动作轻柔,减少细胞机械损伤。
细胞过滤与离心:用合适孔径的细胞筛(如100-200目)过滤细胞悬液,去除未消化的组织块;离心转速通常为1000-1500rpm,时间5-10分钟,避免高速离心导致细胞破裂。
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细胞消化与传代:
方法一:利多卡因消化法
吸出培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液,轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底,37℃温浴3-5分钟
显微镜下观察到细胞回缩变圆后,加入5ml完全培养基稀释消化液
轻轻吹打混匀细胞,1200rpm离心5分钟,弃上清后用完全培养基重悬接种
方法二:胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳,可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,重复上述操作,消化时间控制在1-2分钟
方法三:细胞刮取法
若细胞仍无法消化,加入3ml完全培养基终止消化,用无菌细胞刮轻轻刮取细胞(此方法易造成细胞机械损伤,不推荐)
关键字: 兔胃平滑肌细胞;成纤维细胞样;贴壁;
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