兔下丘脑神经元细胞
产品信息:
产品名称 兔下丘脑神经元细胞
组织来源 脑组织
种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rabbit Hypothalamic Neuron Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 神经元细胞样 | 货号 | P-X2205 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的兔下丘脑神经元细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的兔下丘脑神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:兔下丘脑神经元细胞
组织来源:脑组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件PLL(0.1mg/ml)
培养基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:神经元细胞样
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶兔下丘脑神经元细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
兔下丘脑神经元细胞分离自下丘脑;下丘脑又称丘脑下部,位于大脑腹面、丘脑的下方,是调节内脏活动和内分泌活动的较高级神经中枢所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部(又名视前区和视上区)﹑中部(结节区)和后部(乳头体区)。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与中枢神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶激素的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系,可以接受很多神经冲动,为内分泌系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能,合成神经垂体激素及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养,建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。
原代细胞传代:
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代,避免细胞过度汇合导致接触抑制,影响增殖能力
观察细胞状态:细胞形态正常,无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备:吸出旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞1-2次,去除血清(血清会抑制胰蛋白酶活性)
消化液选择:同原代分离,根据细胞类型选择合适的消化酶,胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟,胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止:显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化,血清浓度不低于10%
细胞吹打:用移液器轻轻吹打细胞,避免过度用力导致细胞破裂,吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整:生长速度快的细胞(如成纤维细胞)可按1:3-1:6传代,生长速度慢的细胞(如内皮细胞、神经细胞)按1:2传代
首次传代比例可适当提高(如1:2),待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布,放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶,避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况,更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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收货与处理流程:
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有异常及时联系。
2. 细胞复苏(仅针对冻存细胞)
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化,时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀,1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液,补加1-2ml培养液吹匀,移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜,第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身,拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时,稳定细胞状态后再进行后续操作
关键字: 兔下丘脑神经元细胞;神经元细胞样;贴壁;
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