对虾白斑综合症病毒（WSSV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 新品

产品介绍：

该试剂盒是水产养殖领域（特别是对虾养殖）中用于诊断白斑综合征（White Spot Syndrome, WSS）的核心工具，能够帮助养殖户和检测机构快速判断虾群是否感染了WSSV病毒。

与普通的PCR或恒温法相比，荧光探针法（通常指TaqMan探针）具有高特异性、高灵敏度和可定量的优势。

 �� 产品核心信息

检测对象：对虾白斑综合症病毒（White Spot Syndrome Virus, WSSV）。

检测原理：实时荧光定量PCR法（qPCR），采用TaqMan荧光探针技术。试剂盒内含针对WSSV保守基因序列（如VP28、VP664等）设计的特异性引物和探针。在PCR扩增过程中，探针被水解，荧光基团（Reporter）与淬灭基团（Quencher）分离，发出荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度来判断样本中是否含有病毒核酸。

检测范围：通常可检测 2×10³ ~ 1×10⁸ copies/mL 的病毒载量，最低检测限可达 10³ copies/mL。

适用仪器：适用于主流的荧光定量PCR仪，如ABI 7500、罗氏LightCycler系列、Bio-Rad CFX96等。

�� 产品组成（以常见规格为例）

组分名称  规格示例  说明

WSSV反应液 (qPCR MIX)  672 μL (48T)  预混了引物、探针、dNTPs、缓冲液等。

酶混合物 (Enzyme MIX)  48 μL (48T)  含Taq DNA聚合酶，通常需-20℃保存。

阳性对照 (Positive Control)  50 μL  含WSSV目标基因片段的质粒或灭活病毒，用于验证试剂有效性。

阴性对照 (Negative Control)  100 μL  无菌水或缓冲液，用于监控实验过程是否被污染。

核酸提取试剂  部分赠送  部分试剂盒会附带简易的DNA提取液（如煮沸法提取液）。

�� 操作流程简述

样本采集：

组织样本：取对虾的鳃、肝胰腺、淋巴器官或血淋巴。幼虾可取完整头胸部。

环境样本：水体样本需经浓缩处理。

注意：若不能立即检测，样本应保存在95%乙醇或-20℃冰箱中。

核酸提取：

使用试剂盒自带的提取液（煮沸法）或商用DNA提取试剂盒（磁珠法/离心柱法）提取样本中的基因组DNA。

关键点：提取的DNA应尽量无蛋白、酚等抑制物。

试剂准备与加样：

将反应液和酶液在冰上解冻混匀。

按比例配制反应体系（通常为20-25 μL体系），向反应管中加入模板DNA（通常5-10 μL）。

设置阴性对照和阳性对照。

上机扩增：

将反应管放入荧光定量PCR仪。

推荐程序：

预变性：95℃ 3-5分钟；

循环反应：95℃ 5-15秒 → 60℃ 30-60秒（收集荧光），共40-45个循环。

结果判读：

阳性（+）：Ct值 < 38，且扩增曲线呈典型的"S"型指数增长。

可疑（±）：Ct值在 38-40 之间，建议复测或重新采样确认。

阴性（-）：无Ct值或Ct值 ≥ 40，且无明显扩增曲线。

质控标准：阳性对照Ct值应<30-35，阴性对照应无扩增。

⚠️ 注意事项与安全提示

严格分区：PCR实验室必须严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止扩增产物污染导致假阳性。

避免反复冻融：酶液和反应液对温度敏感，应避免反复冻融，使用后立即放回-20℃保存。

样本代表性：WSSV在虾体内的分布可能不均匀，建议采集至少5尾病虾进行检测，以提高检出率。

临床意义：WSSV传染性强，发病快（死亡率可达90%以上）。一旦检测出阳性，应立即采取隔离、消毒措施，并排查水源。

公司正在出售的产品：

PCR（聚合酶链式反应）是一种基因扩增技术，

用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环（变性、退火、延伸）扩增目标基因片段，而非培养生物体。

关键点：

无需培养：PCR直接检测样本中的核酸，无需预先培养微生物或细胞。

应用场景：病原体检测（如病毒、细菌）、基因表达分析、遗传病诊断等。