大鼠肾足细胞 新品

大鼠肾足细胞

产品信息：

产品名称 大鼠肾足细胞

组织来源 正常肾脏组织
种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介：

细胞详述

肾小球为血液过滤器，肾小球毛xi血管壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构：内层为内皮、中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层，上皮细胞又称足细胞，其不规则突起称足突，其间有许多狭小间隙，血液经滤膜过滤后，滤液入肾小球囊。在正常情况下，血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中，仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。

肾足细胞即肾小球上皮细胞，它附着于肾小球基底膜的外侧，连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞，体外培养的原代细胞不能增殖。

足细胞呈星型多突状，胞体较大，由胞体伸出许多突起，呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面，并通过黏附分子和蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连。足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜的主要组成成分 IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶，从而在肾小球基底膜的代谢平衡中发挥重要作用。

细胞特性

1)细胞来源于实验动物正常肾脏组织。

2)细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：不规则，含足突细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代肾足 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：

大鼠肾足细胞是存在于大鼠肾小球脏层上皮细胞的一种特殊细胞，其胞体伸出许多足突，与肾小球毛细血管内皮细胞及基底膜共同构成肾小球滤过屏障。足突之间的裂孔膜可阻止蛋白质等大分子物质滤过，在肾小球滤过功能中发挥关键作用，是研究肾小球肾炎、肾病综合征及肾功能衰竭发病机制的重要细胞模型。
原代细胞传代：

传代时机判断

细胞汇合度达到80%-90%时进行传代，避免细胞过度汇合导致接触抑制，影响增殖能力

观察细胞状态：细胞形态正常，无明显漂浮、污染迹象

消化环节控制

消化前准备：吸出旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞1-2次，去除血清（血清会抑制胰蛋白酶活性）

消化液选择：同原代分离，根据细胞类型选择合适的消化酶，胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟，胶原酶消化时间为10-30分钟

消化终止：显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，血清浓度不低于10%

细胞吹打：用移液器轻轻吹打细胞，避免过度用力导致细胞破裂，吹打次数一般为10-15次

传代比例控制

传代比例根据细胞生长速度调整：生长速度快的细胞（如成纤维细胞）可按1:3-1:6传代，生长速度慢的细胞（如内皮细胞、神经细胞）按1:2传代

首次传代比例可适当提高（如1:2），待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例

传代后培养

接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布，放入培养箱中培养

24小时内不要晃动培养瓶，避免细胞贴壁不牢

培养24-48小时后观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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细胞分离与接种：

酶消化的“度”：酶液浓度和消化时间需精准控制，如胰蛋白酶浓度通常为0.25%，消化时间5-15分钟（根据组织类型调整），消化期间每隔3-5分钟轻轻晃动容器，镜下观察到细胞变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化。

吹打力度适中：用巴氏吸管吹打细胞悬液时，避免用力过猛产生大量气泡，以吹打后细胞悬液呈均匀雾状为宜，一般吹打10-15次即可，过度吹打会导致细胞膜破裂。

接种密度适配：根据细胞增殖速度调整接种密度，增殖快的细胞（如成纤维细胞）可适当降低密度，增殖慢的细胞（如神经元）需提高接种密度，确保细胞能相互支持生长。