大鼠肺巨噬细胞

产品定义：

大鼠肺巨噬细胞是存在于大鼠肺组织中的巨噬细胞，包括肺泡巨噬细胞、间质巨噬细胞等亚型。它可吞噬清除肺内的病原体、尘粒及凋亡细胞，参与肺组织的免疫防御和炎症反应调节，同时也参与肺损伤后的修复过程，是研究肺部感染、急性肺损伤、慢性阻塞性肺疾病及肺纤维化等肺部疾病发病机制的重要细胞模型。

产品简介：

细胞详述

肺巨噬细胞由单核细胞分化而来，广泛分布在肺间质内，在细支气管以下的管道周围和肺泡隔内较多。肺巨噬细胞的吞噬、和分泌作用都十分活跃，有重要防御功能。吸入空气中的尘粒、等异物进入肺泡和肺间质，多被巨噬细胞吞噬，故细胞胞质内常见尘粒、等物进入肺泡和肺间质，多被巨噬细胞吞噬，故细胞胞质内常见尘粒、次级溶酶体及吞噬体等。

肺巨噬细胞还可吞噬衰老的红细胞，在心力衰竭患者出现肺瘀血时，大量红细胞从毛xi血管溢出，被巨噬细胞吞噬。吞噬异物的巨噬细胞，有的从肺泡腔经呼吸道粘液流动和纤毛运动而被咳出，有的进入肺管随进入肺结内。

细胞特性

1) 组织来源于实验动物的正常肺组织。

2)细胞鉴定：CD68或MAC387免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：圆形，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代巨噬 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
原代细胞分离：

组织取材

无菌操作是底线：取材前对动物/组织进行严格消毒，全程在超净台内操作，所有工具提前灭菌

新鲜度决定活性：取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中，30分钟内完成分离，若无法即时处理，可暂存于4℃冰箱（不超过24小时）

精准取材：避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织，比如分离肝细胞时要剔除胆囊，分离神经细胞时要去除脑膜

组织处理

机械法：通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织，适用于结缔组织较少的组织（如肝脏、肾脏），注意力度适中，避免过度研磨损伤细胞

酶解法：根据组织类型选择合适的酶：

胰蛋白酶：适用于消化上皮组织、肝、肾等，浓度0.25%-0.5%，消化时间15-30分钟，37℃

胶原酶：适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等，浓度0.1%-0.3%，消化时间1-4小时，37℃，可加入EDTA增强效果

透明质酸酶：常与胶原酶联用，消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织

联合法：机械剪碎后再进行酶解，兼顾效率与细胞活性

细胞筛选与纯化

过滤：使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织块

离心：800-1200RPM离心5-8分钟，弃上清后用PBS重洗2-3次，去除细胞碎片和酶液

特异性纯化：使用差速贴壁法（利用不同细胞贴壁速度差异）、密度梯度离心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分选或流式细胞术，获得高纯度目标细胞
实验后处理：

废弃样本处理：

细胞废弃物消毒：实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放，培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。

动物组织处理：剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋，由专业机构进行无害化处理，避免生物污染。

实验设备清洁：

超净工作台清洁：实验结束后用75%酒精擦拭台面，打开紫外灯照射30分钟，关闭风机。

培养箱定期清洁：每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板，每2周更换一次培养箱内的水盘，避免滋生细菌。

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