重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
LRG1 是一种分泌型糖蛋白,属于富含亮氨酸重复序列(LRR)蛋白家族,在炎症、病理性血管生成及纤维化过程中扮演关键角色。其核心机制涉及与转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的相互作用,既能促进血管内皮细胞的异常增殖,也能激活成纤维细胞,从而驱动细胞外基质的沉积与纤维化进程。此外,LRG1 还能通过稳定缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)来促进角质形成细胞的迁移,加速伤口再上皮化。鉴于其在多种疾病(如增生性瘢痕、肾脏纤维化及癌症)中的重要作用,该重组蛋白是探索疾病机制、开发潜在治疗靶点及生物标志物的关键研
产品名称; Recombinant Human LRG1
别名; 1300008B03Rik, 2310031E04Rik, A2GL, A2GL_HUMAN, HMFT1766, Leucine rich alpha 2 glycoprotein, Leucine-rich alpha-2-glycoprotein, Leucine-rich alpha-2-glycoprotein 1, Leucine-rich alpha-2-glycoprotein precursor, LRG, LRG1
宿主; E.Coli
表达区间; 36-347
分子量; 34.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
髓细胞/淋巴细胞或混合谱系白血病蛋白6 | 组织乙酰酯酶活性化学发光法定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化蛋白激酶PKMYT1(Thr495) | MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒 |
糖果甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 石蜡切片组织DAP KINASE蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
组蛋白脱乙酰化酶4(HDAC4)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 组织3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性酶动力比色法 |
气生兰(epiphytic)克隆增殖培养基 | SOLO蛋白抗体 |
高尔基体磷蛋白3样蛋白 | LRBA蛋白抗体 |
线粒体复合物V蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 动物细胞氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法 |
通用型野油菜黄单孢菌柑桔致病变种(Xanthomonas campestris pv. Campestris;Xcc)基因pcr检测试剂盒 | 动物肾上腺组织细胞分离培养试剂盒 |
组蛋白乙酰转移酶MORF | DOCK9蛋白抗体 |
霍乱肠毒素β链 | 磷脂酰胆碱2-乙酰水解酶3抗体 |
RAS家族关联结构域蛋白8 | 垂体瘤转化蛋白2抗体 |
植物组织膜性囊泡(vacuole)分离试剂盒 | Recombinant Human LRG1雪藻脂肪酸延长酶抗体 |
人IgG-Fc段单克隆抗体 | ADCK4蛋白抗体 |
关键字: LRG1;34.2 kDa ; 36-347;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。