操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
该蛋白是一种关键的DNA修复酶，其核心功能是保护基因组稳定性。它能通过一种“自杀式”修复机制，直接将DNA鸟嘌呤O6位点上的烷基（如甲基）转移至自身活性位点的半胱氨酸残基上，从而修复由烷化剂（如替莫唑胺TMZ）引起的DNA损伤。一旦完成修复，MGMT蛋白即失活并被降解。因此，细胞内的MGMT活性水平直接决定了肿瘤细胞对烷化剂类化疗药物的敏感性，在胶质瘤等癌症的临床治疗和预后评估中具有重要价值。
产品名 | Recombinant Human MGMT | 分子量 | 22.7 kDa |
表达区间 | 1-207 | 货号 | XG-DB2629 |
别名
6 O methylguanine DNA methyltransferase, 6-O-methylguanine-DNA methyltransferase, Agat, AGT, AI267024, EC 2.1.1.63, Methylated DNA protein cysteine methyltransferase, Methylated-DNA--protein-cysteine methyltransferase, Methylguanine DNA methyltransferase, MGC107020, MGMT, MGMT_HUMAN, O 6 methylguanine DNA alkyltransferase, O 6 methylguanine DNA methyltransferase
宿主; E.Coli
表达区间; 1-207
分子量; 22.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品：
唐氏综合症细胞粘附分子2 | 细菌抗生素（青）敏感性DISC弥散（KIRBY-BAUER）酶联免疫试剂盒 |
酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型12 | 组织糖原硫酸蒽酮比色法定量酶联免疫试剂盒 |
40%ACRYLAMIDE-BIS（19:1）溶液 | 载玻片细胞CASPASE-9蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
血液肾素（renin）荧光共振能量转移法（FRET）定量pcr检测试剂盒 | 石蜡切片胶原纤维（SIRIUS RED）染色试剂盒 |
毛发汞元素比色法定量pcr检测试剂盒 | WDR35蛋白抗体 |
骨骼肌快/慢肌肌钙蛋白T | KIAA1970蛋白抗体 |
细胞TNF ALPHA蛋白表达荧光定量pcr检测试剂盒 | 细胞基质金属抑制剂1（TIMP-1）活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
通用型鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease/GumboroDisease；IBD）基因pcr检测试剂盒 | 冰冻切片组织衰老特异性晚期脂褐素铁还原法 |
组织相容性复合体蛋白2反式激活因子 | FAM80A蛋白抗体 |
甲基化CpG结合蛋白2 | 脑啡肽抗体 |
RNA结合蛋白14 | 肠和大脑特定同源蛋白1抗体 |
水样品内毒素比色法定量pcr检测试剂盒 | Recombinant Human MGMT原蛋白转化酶4抗体 |
HRP标记的人CD34单克隆抗体 | APC标记小鼠CD62L单克隆抗体 |
重组蛋白生产流程：
通常包括以下几个核心步骤：
基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。
构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。
纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。
关键字： MGMT;22.7 kDa ;1-207;
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