重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human P100 是指通过重组DNA技术生产的人源转录共激活因子P100(也称为NF-κB2)。该蛋白作为一种关键的调控分子,能够通过其特定结构域(如Tudor-SN片段)与多种转录因子及RNA聚合酶Ⅱ直接结合,充当桥梁连接转录调控复合物与基础转录机制,从而参与多条信号通路的基因转录调控;此外,它还被证实能通过与U5 snRNP蛋白相互作用参与pre-mRNA的剪接加工过程,影响剪接体的组装与功能。
产品名称; Recombinant Human P100
别名; DNA binding factor KBF2, H2TF1, LYT 10, LYT10, NFKB2, NFKB2,p100, NFKB2,p52,p100, Oncogene Lyt 10, p100, p52
宿主; E.Coli
表达区间; 217-454
分子量; 46 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
丝裂原活化蛋白激酶MAP4K5 | 体液科萨基病毒A(Coxsackievirus A)定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
口蹄疫病毒A1型VP1 | 寡核苷酸探针非同位素AP-BCIP/NBT法DNA南方杂交完全试剂盒 |
食物糖精(saccharin)含量高效液相色谱法法定量pcr检测试剂盒 | 细胞TRAIL 蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
细胞SPHK激酶总活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 植物a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量酶联免疫试剂盒 |
植物源性食品土豆(potato)基因pcr检测试剂盒 | SUSD4蛋白抗体 |
缝隙样蛋白Slitl2 | G氨基丁酸A型受体rho2 /GABAA Rρ2抗体 |
细胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表达流式细胞仪pcr检测试剂盒 | 细胞酸性磷酸酶总活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
食物(folic acid)含量比色法定量pcr检测试剂盒 | 纯化线粒体II型L-3羟酰基-CoA 脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
轴丝动力蛋白8 | DNA损伤诱导转录蛋白4抗体 |
环指蛋白187 | 磷酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体 |
NXT2蛋白 | 促黄体激素诱导蛋白5抗体 |
动物组织微粒体组分分离试剂盒 | Recombinant Human P100氧固醇结合蛋白样7抗体 |
磷脂酰肌醇激酶调节亚单位gamma重组兔单克隆抗体 | APC-Cy7标记人CD38单克隆抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: P100;46 KDa; 217-454;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。