测定意义 :

HK(EC 2.7.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶,催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
产品名称 | 己糖激酶(HK)测试盒(比色法) | 规格 | 100管/96样、50管/48样 |
检测方法 | 微量法、紫外分光光度法 | 货号 | AS6321159 |
测定原理

HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
核心组成:

一个完整的试剂盒通常包含以下关键组分:
底物: 与待测物发生反应的化学物质(如过氧化氢、NADH等)。
酶: 具有高度特异性的催化剂(如葡萄糖氧化酶、胆固醇酯酶等),加速反应进行。
缓冲液: 维持反应体系的pH值稳定。
显色剂/终止液: 使反应产生颜色变化或在特定时间点终止反应,便于检测。
标准品/校准品: 用于建立标准曲线,从而准确定量样本中的待测物浓度。
通用试验步骤:

1. 实验准备
试剂准备: 从冰箱取出所需试剂,平衡至室温(通常为20-25℃)。检查试剂是否在有效期内,有无浑浊、沉淀或变色。如试剂为冻干粉或浓缩液,需严格按照说明书进行复溶和混匀。
仪器与耗材: 准备好实验所需仪器(如分光光度计、酶标仪、离心机、移液器)和耗材(如比色皿、96孔酶标板、枪头)。确保仪器已校准,耗材洁净无污染。
样本处理: 根据检测要求采集样本(如血液、组织、细胞)。血液样本通常需静置凝固后离心分离血清,或使用抗凝管采集血浆。处理后的样本若不立即使用,应按要求(如-20℃)保存,避免反复冻融。
2. 标准曲线制备(如需)
目的: 用于将测得的信号值(如吸光度)转换为待测物的浓度。
操作: 使用试剂盒提供的标准品,按照说明书进行系列稀释,配制成一系列已知浓度的标准品溶液。后续与样本一同进行检测。
3. 加样与反应
这是核心操作步骤,主要有两种常见模式:
模式一:一步法(常见于比色法等)
模式二:多步法(常见于ELISA法)
4. 信号检测
反应结束后,立即使用相应仪器进行检测。
比色法: 使用分光光度计,在说明书指定的波长(如340nm, 546nm)下测定吸光度(OD值)。
ELISA法: 使用酶标仪,在指定波长(如450nm)下测定OD值。
注意: 加入终止液后应尽快检测,尤其是ELISA法,以保证结果的准确性。
5. 数据分析
标准曲线: 以标准品的浓度为横坐标,测得的OD值为纵坐标,绘制标准曲线。
计算结果: 根据样本的OD值,从标准曲线上查出对应的浓度。如果样本经过了稀释,需乘以稀释倍数,得到其原始浓度。
公司正在出售的产品:
DENND4A DENND4A蛋白抗体 | 大鼠Apelin受体(APLNR)检测试剂盒 |
前列腺癌和乳腺癌高表达蛋白抗体 | 人钙卫蛋白检测试剂盒 |
TERF2IP 多巴胺受体相互作用蛋白5单克隆抗体 | 大鼠脂氧素A4(LXA4)检测试剂盒 |
神经细胞鸟苷酸置换因子NGEF抗体 | 小鼠激活蛋白C(APC)检测试剂盒 |
IFNAR1 干扰素α/β受体1抗体 | 大鼠基质Gla蛋白(MGP)检测试剂盒 |
胞浆钙独立磷脂酶A2抗体 | 小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)检测试剂盒 |
MT-ATP6 ATP6蛋白抗体 | 人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)检测试剂盒 |
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MHC class I antigen B 15 组织相关抗原HLA-B15抗体 | 可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒 |
FKBP51重组兔单克隆抗体 | 小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)核酸检测试剂盒 |
ZNF342 锌指蛋白342抗体 | 己糖激酶(HK)测试盒(比色法)大鼠神经生长因子受体(TNFR superfamily,member 16)(NGFR)检测试剂盒 |
烟碱型乙酰胆碱受体β1抗体 | 小鼠补体成分4b(C4b)检测试剂盒 |
Phospho-MAPKAPK2 (Thr222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 | 人白介素17A(IL-17A)检测试剂盒 |
常见分类与检测原理:
根据检测方法学的不同,生化试剂盒主要分为以下几类:
检测方法 原理简述 典型应用
比色法/分光光度法 通过测定反应体系颜色深浅(吸光度)来定量,如Trinder反应。 检测葡萄糖、尿酸、总蛋白等。
酶联免疫法 (ELISA) 利用抗原-抗体特异性结合反应,通过酶促显色来检测。 检测特定蛋白、细胞因子、激素等,如人游离血红蛋白。
生物发光法 利用荧光素酶催化底物发光,通过检测发光强度来定量。 如ATP检测试剂盒,灵敏度极高。
此外,还有化学发光法、胶乳增强免疫比浊法等。
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