重组蛋白是如何“诞生”的?
重组蛋白的生产过程就像是一场精密的分子手术,主要分为以下几个步骤:
基因克隆:科学家先找到并复制出决定该蛋白质结构的“基因蓝图”(目的基因)。
构建载体:将这段“基因蓝图”插入到一个被称为“载体”(通常是质粒或病毒)的运输工具中。
转入宿主:把这个携带了新指令的载体送入“工厂”(宿主细胞,如大肠杆菌、CHO细胞等)。
表达与纯化:宿主细胞根据新指令大量生产蛋白质,最后科学家通过复杂的工艺将这些蛋白质分离、纯化出来。
产品概述:
该蛋白通常为带有N端GST或His标签的融合蛋白,对应于人源SIRT5的全长氨基酸序列(1-310 aa),分子量约为58 kDa(包含标签)。SIRT5属于NAD⁺依赖的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶家族,主要定位于线粒体。其核心功能是作为一种多功能的去酰基化酶,不仅具有去乙酰化活性,还表现出更强的去琥珀酰化、去丙二酰化和去戊二酰化活性。通过调控多种代谢酶(如谷氨酸脱氢酶GLUD1、超氧化物歧化酶SOD1)的翻译后修饰状态,SIRT5在维持线粒体代谢稳态、清除活性氧(ROS)、调节细胞能量代谢及抗氧化应激中发挥关
产品名称; Recombinant Human SIRT5
别名; NAD dependent deacetylase sirtuin 5, NAD dependent lysine demalonylase and desuccinylase sirtuin 5 mitochondrial, NAD dependent protein deacylase sirtuin 5 mitochondrial, NAD-dependent protein deacylase sirtuin-5, mitochondrial, Regulatory protein SIR2 homolog 5, Silent mating type information regulation 2 S.cerevisiae homolog 5, Sir2 like 5, SIR2-like protein 5, SIR2L5, SIR5_HUMAN, Sirt5, Sirtuin 5
宿主; E.Coli
表达区间; 37-284
分子量; 47.6 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
核心应用:
重组蛋白技术是现代生物技术、医学研究和制药工业的基石,应用极为广泛。
生物制药
这是重组蛋白最核心和价值最高的应用领域。许多过去只能从人或动物体内提取、来源稀少且昂贵的药物,现在都可以通过重组技术大规模生产。例如:
细胞因子:如促红素(治疗贫血)、干扰素(抗病毒、抗肿瘤)、白细胞介素等。
激素:如重组人胰岛素(治疗糖尿病)、人生长激素。
凝血因子:用于治疗血友病。
单克隆抗体:已成为肿瘤、自身免疫性疾病等领域最重要的治疗药物之一。
疫苗开发
重组蛋白疫苗是一种重要的疫苗类型。它通过基因工程在体外细胞中表达病毒的关键抗原蛋白(如新冠病毒的RBD蛋白),纯化后制成疫苗。这类疫苗不含活病毒,安全性高,且抗原成分精确、纯度高。
科研与诊断
重组蛋白是生命科学研究中不可或缺的工具。
细胞培养:作为生长因子、细胞因子等添加剂,用于干细胞诱导、细胞分化等研究。
免疫学研究:作为抗原用于开发ELISA等免疫检测试剂盒,或用于产生抗体。
结构与功能研究:帮助科学家研究蛋白质的结构、功能以及细胞信号通路。
公司正在出售的产品:
透明质酸受体 | 细菌甘露醇盐(MSA)选择琼脂平板 |
酪氨酸羟化酶 | 全组织免疫组织化学HRP酶联DAB间接酶联免疫试剂盒(含HRP二抗) |
磷酸二酯酶4B(Phosphodiesterase 4B) | 冰冻切片组织CASPASE-8蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
单酸甘油脂脂解酶(monoacylglycerol lipase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 冰冻切片氧化酶和琥珀酸脱氢酶(Combined COX-SDH)双酶活性染色试剂盒 |
植物组织膜性囊泡(vacuole)分离试剂盒 | α胰蛋白酶重链H4抗体 |
海马丰富基因转录蛋白1 | HILS1蛋白抗体 |
TNF ALPHA蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 通用型组织对氧磷酶1(PON1)有机磷酸酶活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒 | BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖NBT显色pcr检测试剂盒 |
转运蛋白SEC63 | DHX40蛋白抗体 |
肌球蛋白重链 | 磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体 |
PE标记人CD107a单克隆 | 短卷曲螺旋蛋白SCOC抗体 |
乳酸球菌(Lactococcus)噬菌体特异性PCR扩增pcr检测试剂盒 | Recombinant Human SIRT5异质核核糖核蛋白D样蛋白抗体 |
AbBy Fluor® 647标记的小脑肽2抗体 | APC标记小鼠CD80单克隆抗体 |
重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: SIRT5;47.6 kDa; 37-284;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。