重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白属于嘧啶核苷磷酸化酶家族,其核心生化功能是催化胸苷(Thymidine)和磷酸盐可逆地转化为胸腺嘧啶(Thymine)和 2-脱氧核糖-1-磷酸(2-deoxyribose-1-phosphate)。除了在核苷酸“补救合成”途径中维持核苷酸池稳态的核心代谢作用外,该酶在肿瘤微环境中表现出双重关键功能:一方面,其催化产物 2-脱氧核糖 是一种强效的血管生成诱导因子,能促进肿瘤新生血管形成;另一方面,它作为多种核苷类前药(如卡培他滨)的关键激活酶,在癌症化疗中扮演着“双刃剑”的角色。此外,TYMP 基因
产品名 | Recombinant Human Thymidine Phosphorylase | 分子量 | 51.8 kDa |
表达区间 | 11-482 | 货号 | XG-DB3612 |
别名
ECGF, ECGF 1, ECGF1, Endothelial cell growth factor 1, Endothelial cell growth factor 1 platelet derived, Endothelial cell growth factor, platelet-derived, Gliostatin, hPD ECGF, MEDPS1, MNGIE, MTDPS1, PD ECGF, PD-ECGF, PDECGF, PDEGF, Platelet derived endothelial cell growth factor, Platelet derived endothelial growth factor, Platelet-derived endothelial cell growth factor, TdRPase, Thymidine phosphorylase
宿主; E.Coli
表达区间; 11-482
分子量; 51.8 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
天冬氨酰tRNA连接酶2 | 冰冻切片免疫荧光显微镜完全间接酶联免疫试剂盒(含一抗和荧光二抗) |
EFHD1蛋白 | 冰冻切片组织RHO 蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
体液维生素B1高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 冰冻切片组织CASPASE-2蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)鉴定 | 植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)完全试剂盒(包括抗体) |
组织MET激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 磷脂重塑基因SERAC1抗体 |
钙激活钾通道蛋白KCNT2 | 弹性蛋白酶抑制剂抗体 |
植物培养细胞DNA损伤彗星完全荧光pcr检测试剂盒 | 细胞多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
N――苯甲酰-DL-精对硝基苯胺盐酸盐(BAPNA) | 细胞JNK3激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
肿瘤血管内皮标记相关蛋白质7 | 血型Lewis A抗原抗体 |
肌聚多糖-β | Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白8抗体 |
PE-Cy7标记人CD69单克隆 | 跨膜蛋白NOTCH4配体抗体 |
细胞角蛋白16重组兔单克隆 | Recombinant Human Thymidine PhosphorylaseTRIM26蛋白抗体 |
细菌内毒素浊度法定量检测试剂盒 | G蛋白偶联受体MRGX2蛋白抗体 |
关键字: Thymidine Phosphoryl;51.8 kDa; 11-482;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。