操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

ENO1是糖酵解途径中的核心酶,其核心功能是催化2-磷酸甘油酸(2-PGA)脱水生成磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),为细胞提供能量(ATP)和代谢中间物。除了经典的胞质糖酵解功能外,ENO1还表现出显著的“多功能性”(Moonlighting functions):它可表达于细胞膜表面作为纤溶酶原受体,参与细胞迁移与入侵;在细胞核中,它作为MYC启动子结合蛋白(MBP-1)发挥转录抑制作用;此外,它还参与DNA复制、RNA剪接及应激颗粒的形成。在病理生理层面,ENO1的异常表达与肿瘤(如胃癌、乳腺癌)的化疗耐
产品名 | Recombinant Mouse ENO1 | 分子量 | 47.4 kDa |
表达区间 | 2-433 | 货号 | XG-DB3965 |
别名
2 phospho D glycerate hydro lyase, 2-phospho-D-glycerate hydro-lyase, Alpha enolase, Alpha enolase like 1, Alpha-enolase, C myc promoter binding protein, C-myc promoter-binding protein, EC 4.2.1.11, eno1, ENO1L1, ENOA_HUMAN, Enolase 1, Enolase 1 (alpha), Enolase 1 (alpha) like 1, Enolase alpha, MBP 1, MBP-1, MBP1, MBPB1, MPB 1, MPB-1, MPB1, MYC promoter binding protein 1, NNE, Non neural enolase
宿主; E.Coli
表达区间; 2-433
分子量; 47.4 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

丝裂原活化蛋白激酶p38α | 动物组织β-半乳糖苷酶报告基因活性高质敏感比色法定量检测试剂 |
柯萨奇病毒蛋白受体B | 石蜡切片组织ER BETA 蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
磷酸二酯酶系列高通量筛选光谱法pcr检测试剂盒 | PAR-3蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
组织葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量pcr检测试剂盒 | GST融合蛋白阳性表达树脂电泳筛选试剂盒 |
转基因油菜(canola)GT73品系基因pcr检测试剂盒 | 脑环核苷酸门控通道蛋白1/HCN1抗体 |
富含亮氨酸α2糖蛋白 | Hermansky-Pudlak综合征蛋白3抗体 |
体液氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 | 组织样品组织D(CATHEPSIN D)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
饮料乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量pcr检测试剂盒 |
转运蛋白DISP2 | DNAJB7蛋白抗体 |
活化T细胞核因子5蛋白 | 脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体 |
p19ARF抑癌基因 | 多配体聚糖4抗体 |
脑型脂肪酸结合蛋白重组兔单克隆 | Recombinant Mouse ENO1血小板源性生长因子A抗体 |
葡萄糖 | 5号染色体开放阅读框45抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: ENO1;47.4 kDa; 2-433;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。