大鼠骨骼肌细胞
产品信息:

英文名称:Rat Skeletal Muscle Cells
组织来源:骨骼肌组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的大鼠骨骼肌采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠骨骼肌经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠骨骼肌细胞 | 组织来源 | 骨骼肌组织 |
英文名称 | Rat Skeletal Muscle Cells | 货号 | A01X1650 |
细胞简介:

大鼠骨骼肌分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞,细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方,细胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
培养信息:

包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养操作:

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm³),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10⁵ cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中静置培养。
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实验注意点:

代数控制:尽量在低代数(如P3-P10)进行实验,以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。
操作轻柔:原代细胞对环境变化敏感,解冻和传代时需格外小心,避免机械损伤。
营养需求:它们往往需要更复杂的营养成分(如特定的生长因子、血清),普通的培养基可能无法满足其生长需求。
关键字: 大鼠骨骼肌细胞;骨骼肌组织;贴壁;
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