产品介绍:

1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术,特异性识别大鼠uPA的活性形式(33kDa)和酶原形式(55kDa)。预包被抗大鼠uPA单抗(靶向kringle结构域)捕获样本中的uPA,生物素标记的二抗(识别催化结构域)通过链霉亲和素-HRP系统催化TMB显色,450nm吸光度值与uPA浓度正相关。
产品名称 | 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)elisa试剂盒 | 英文名称 | RatuPA ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129676 |

2. 核心组分

组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃(含干燥剂) 高亲和力单抗(Kd=0.2nM)
重组标准品 0-50ng/mL -80℃ 活性uPA(比活性≥10万IU/mg)
血浆稳定液 10mL 4℃ 含PAI-1抑制剂
肿瘤裂解液 20mL -20℃ 含1% Triton X-100
纤溶酶原底物 1mL -80℃ 验证活性用(S-2444)
3. 性能参数

检测范围:0.5-30ng/mL(可扩展至100ng/mL)
灵敏度:0.15ng/mL(基于2SD空白值)
样本兼容性:
最佳:肿瘤组织匀浆(1:5稀释)
适用:血浆(枸橼酸盐抗凝)、尿液(10倍浓缩)
交叉反应:
大鼠uPA:100%
tPA:<0.1%
人uPA:12%(种属交叉)
精密度:
批内CV:5.3-7.1%
批间CV:8.5-10.8%
4. 样本处理规范
4.1 肿瘤组织处理
取50mg肿瘤边缘组织
加入450μL冷裂解液
珠磨仪匀浆(4℃,40Hz,30秒)
4℃ 15000×g离心30分钟
4.2 血浆采集
使用3.2%枸橼酸钠管(1:9抗凝)
立即冰浴,4℃ 3000×g离心15分钟
分装后-80℃保存(≤2次冻融)
4.3 活性验证
阳性对照:HT-1080细胞培养上清
阴性对照:加入10μM amiloride的样本
5. 实验操作要点

标准曲线制备
梯度稀释:0、0.5、1、2.5、5、10、20、30ng/mL
复溶液:含0.01% Tween-80的TBS
关键步骤控制
孵育条件:37℃恒温振荡(180rpm)
洗板程序:自动洗板机(300μL/孔×6次)
显色终止:2M HSO(50μL/孔)
质控标准
空白OD值:≤0.08
最低检测限:≥0.5ng/mL
活性验证:纤溶酶原激活率≥80%
6. 主要应用方向

肿瘤转移研究:uPA/uPAR系统功能分析
创伤修复:伤口愈合过程监测
纤维化疾病:肺/肝纤维化评估
血栓溶解:溶栓治疗药效评价
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
注意事项

避免样本溶血和反复冻融,样本如不能立即检测建议分装-20℃保存
试剂盒仅供科研使用,不用于临床诊断
不同批号试剂不可混用,所有试剂使用前需摇匀
洗涤过程需彻底,避免交叉污染和板内干燥
显色底物TMB需避光保存,使用前配制
公司正在出售的产品:

组织氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 | 富含亮氨酸重复蛋白20抗体 |
组织COT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 组蛋白去甲基转移酶JMJD7抗体 |
10倍Tris-T浓缩缓冲清理溶液 | RBMXL1蛋白抗体 |
EFHD1蛋白抗体 | 同源结构蛋白1抗体 |
3号染色体开放阅读框21抗体 | APC标记小鼠CD19单克隆抗体 |
颗粒溶素抗体 | 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗体 |
有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体 | 麻风杆菌(Leprosy Bacilli)染色试剂盒 |
细胞TUNEL荧光法(Fluorescein)测定试剂盒 | 细菌氧化酶定性检测试剂盒 |
植物种子活性叶绿体分离试剂盒 | ATP依赖解旋酶ERCC6抗体 |
体液超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 | 微管蛋白γ单克隆抗体 |
纯化微粒体磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性荧光定量检测试剂盒 | 磷酸化蛋白激酶Cη抗体 |
脑型肌酸激酶B型抗体 | 通用型CHIP DNA分子库构建试剂盒 |
环指蛋白27抗体 | 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)elisa试剂盒AF750标记的神经细胞分化因子1抗体 |
PDGF-A蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 | 饮料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
关键字: 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物 ;RatuPA ;ELISA试剂盒;
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本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒; 另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。