产品介绍:

兔Coagulation factor H (CFH) ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆及组织匀浆等样本中的补体因子H(CFH)含量。补体因子H是一种重要的补体调节蛋白,主要通过抑制补体旁路途径的过度激活,维持免疫稳态和血管内皮功能。该指标在炎症、感染、自身免疫病及血栓性疾病等研究中具有重要意义。
产品名称 | 兔Coagulation factor H(CFH)elisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit Coagulation factor H(CFH) ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129946 |
检测原理
采用双抗体夹心ELISA法,酶标板上预包被抗兔CFH特异性抗体,样本中的CFH与抗体结合后,加入酶标二抗,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,催化底物显色,颜色深浅与CFH浓度成正比。

试剂盒组成

预包被抗CFH单抗的96孔板
重组兔CFH标准品
生物素-链霉亲和素-HRP系统
样本稀释液
洗涤液
显色底物(TMB)
终止液
操作步骤

样本准备:血清、血浆或组织匀浆等,建议做复孔,样本需提前平衡至室温。
加样:加入标准品和待测样本,37℃孵育1.5小时。
洗涤:洗板,去除未结合物质。
加酶标二抗:37℃孵育1小时。
显色与终止:加入底物避光反应,终止液终止反应。
读数:酶标仪450 nm测定吸光度,根据标准曲线计算CFH浓度。
注意事项
严格按说明书操作,避免交叉污染。
标准品和样本避免反复冻融。
试剂盒应2-8℃冷藏保存,未用完的板条密封冷藏。
血浆样本建议使用枸橼酸钠抗凝,组织匀浆需添加蛋白酶抑制剂。
应用领域

用于兔补体系统相关疾病、炎症、血栓、自身免疫病等机制研究。
可支持病理学、免疫学及药物开发等方向的科学实验。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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