兔Endothelin-1elisa试剂盒
产品简介:
英文名称 | Rabbit Endothelin-1 ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A129948 | 规格 | 48T/96T |
兔Endothelin-1 ELISA试剂盒是一种用于定量检测兔血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液等生物样本中内皮素-1（ET-1）含量的专用试剂盒，广泛应用于心血管疾病、内皮功能障碍、高血压及肿瘤等科研领域。
1. 检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA）：
酶标板微孔预先包被抗兔ET-1特异性抗体；
样本中的ET-1与固相抗体结合，加入酶标记的检测抗体后形成免疫复合物；
加入显色底物（如TMB），酶催化反应使溶液显色，颜色深浅与ET-1浓度成正比；
用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样本浓度。
2. 主要组成
预包被微孔板（96孔或48孔）
酶标检测抗体（HRP-抗ET-1）
标准品（用于绘制标准曲线）
样品稀释液、洗涤液、底物液、终止液
封板膜、说明书
3. 检测步骤（简要）
将标准品和待测样本加入微孔，37℃孵育1小时；
洗涤微孔板，去除未结合物质；
加入酶标抗体，37℃孵育1小时；
再次洗涤，加入底物液，避光显色；
加终止液，酶标仪读数，依据标准曲线计算样本浓度。
4. 保存与注意事项
试剂盒一般2-8℃保存，有效期6个月，避免反复冻融和阳光直射；
样本如需长期保存，建议分装后于-20℃或-80℃冷冻；
检测前需将试剂恢复至室温，严格按说明书操作，避免交叉污染。
5. 应用领域
心血管及内皮功能研究：检测兔在不同病理或生理状态下ET-1的表达水平；
肿瘤、高血压和组织缺血等疾病机制研究；
药物开发与疗效评价、疾病进展监测等。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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