产品介绍:

兔Granzyme B ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等多种生物样本中Granzyme B(颗粒酶B)的含量。Granzyme B是一种由细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞释放的丝氨酸蛋白酶,参与细胞凋亡信号传导,在免疫调节、抗肿瘤和抗病毒感染等免疫应答过程中发挥重要作用。
产品名称 | 兔Granzyme Belisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit Granzyme B ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A130069 |

检测原理
采用双抗体夹心ELISA法:酶标板上预包被抗兔Granzyme B特异性抗体,样本中的Granzyme B与抗体结合后,加入酶标二抗,形成夹心复合物,催化底物显色,颜色深浅与Granzyme B浓度成正比。
试剂盒组成(典型)

预包被Granzyme B抗体的酶标板
Granzyme B标准品
酶标抗体(如HRP标记)
样本稀释液
洗涤液
显色底物(TMB)
终止液
操作步骤

样本准备:按需做复孔,样本建议平衡至室温。
加样:分别加入标准品和待测样本,37℃孵育一定时间。
洗涤:弃去液体,洗板3-5次。
加酶标二抗:37℃孵育45-60分钟。
显色与终止:加入底物避光反应,终止液终止反应。
读数:酶标仪450 nm测定吸光度,根据标准曲线计算Granzyme B浓度。
注意事项
严格按照说明书操作,避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融,未用完的板条密封冷藏(2-8℃)。
试剂盒组分不可混用,标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理,避免溶血和杂质干扰。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 兔;Granzyme B;ELISA试剂盒;
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