产品用途

用于丹毒丝菌属(包括红斑丹毒丝菌等)的定性或定量检测,适用于科研领域。
产品名称 | 丹毒丝菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Erysipelothrix spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3895 |

产品特点

高特异性:引物基于丹毒丝菌属高度保守基因区域设计,避免与其他细菌发生交叉反应。
高灵敏度:采用优化引物及扩增体系,灵敏度较常规PCR提升100倍。
即开即用:用户仅需提供DNA模板,试剂盒包含预混反应液,简化操作流程。
安全对照:提供无传染性阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),便于区分假阴性结果。
防污染设计:一管式闭管操作,减少气溶胶污染风险。
高通量兼容:支持20μL反应体系,适配主流荧光定量PCR仪。
试剂盒组成

| 组分编号 | 成分名称 | 规格/体积 | 包装特征 |
| A | 2×qPCR MagicMix | 500 μL/管 | 棕色管 |
| B | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| C | 丹毒丝菌属PCR引物混合物 | 100 μL/管 | 白盖 |
| D | PCR阳性对照 | 50 μL(1×10⁸拷贝/μL) | 红盖 |
| E | DNA病毒裂解液(可选) | 200 μL | 蓝盖 |
| F | 阴性对照 | 200 μL | 透明盖 |
规格:50次反应(20μL/次)
保存条件:-20℃避光保存,有效期2年。
实验操作流程

样本制备:提取待测样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制(以20μL为例):
2×qPCR MagicMix:10 μL
引物混合液:0.8 μL
DNA模板:2 μL
模板稀释液补足至20 μL。
PCR程序设置:
预变性:95℃ 5分钟;
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
溶解曲线分析:60℃至95℃,每0.5℃升温5秒。
结果判读
定性检测:
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线呈典型S型;
阴性:Ct值≥40或无扩增;
可疑(Ct值35-40):需重复检测,重复后Ct<40判为阳性。
定量检测:
以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,通过待测样本Ct值推算初始浓度。
注意事项

实验前需校准荧光定量PCR仪器,确保通道参数匹配(如SYBR Green I)。
阳性对照需最后加入,避免污染。
反应液分装后避免反复冻融,建议使用前离心10秒。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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关键字: 丹毒丝菌属通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;