乙型副伤寒沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Salmonella paratyphi B Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4038
技术原理
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术,通过特异性引物扩增乙型副伤寒沙门氏菌的靶基因序列,结合荧光染料(如SYBR Green)实时监测扩增产物,实现定量检测。
产品特点
即开即用:预混反应体系,用户仅需提供DNA模板。
高灵敏度与特异性:优化引物设计,可特异性识别乙型副伤寒沙门氏菌。
操作简便:包含预混酶、dNTPs、缓冲液等组分,减少操作步骤。
操作步骤
DNA模板制备:
提取待测样本(如细菌培养物)基因组DNA,建议使用商用DNA提取试剂盒。
PCR反应体系配制:
按说明书比例混合预混液、引物、模板DNA及无核酸酶水。
荧光定量PCR程序:
预变性:95℃ 5分钟(确保DNA完全解链)。
循环扩增:95℃ 15秒→60℃ 30秒(40个循环),采集荧光信号。
结果分析:
根据扩增曲线Ct值判定样本中目标菌的存在及浓度。
注意事项
避免污染:实验分区操作,使用无菌耗材。
质量控制:建议设置阴性对照(无模板)和阳性对照(标准品)。
保存与运输:避免反复冻融,干冰运输。
常见问题解决
无扩增信号:检查模板质量或引物降解。
非特异性扩增:优化退火温度或重新设计引物。
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