产品概述
本试剂盒采用SYBR Green I染料法荧光定量技术，专为梅恩君病毒（Mayne virus）RNA检测设计，整合反转录（RT）与实时定量PCR（qPCR）于单管反应体系，实现高效、高灵敏度的核酸定量分析。适用于临床样本、环境监测及科研领域的病毒载量检测。
产品名称 | 梅恩君病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Main Drain Virus (MDV) Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3983 |
产品组分
2× Advanced SG Buffer：含优化缓冲液与SYBR Green I染料，支持单管RT-qPCR反应。
UH Enzyme Mix：耐热反转录酶（Hifair® V）与热启动Taq DNA聚合酶（UNICON® HotStart）预混，确保高扩增效率。
RNase-free H₂O：无核酸酶水，用于反应体系配制。
阳性对照：非传染性梅恩君病毒DNA片段（1×10⁸拷贝/μL），用于标准曲线制备与质控。
技术参数
灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或1 pg（中等表达靶标）。
特异性：引物针对梅恩君病毒保守区设计，无交叉反应。
线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²–10⁷拷贝/μL）。
稳定性：预混液在4℃下可保存24小时，性能无显著变化。
操作流程
标准曲线制备：
将阳性对照按10倍梯度稀释（10²–10⁷拷贝/μL），独立操作以避免污染。
反应体系配制（20 μL/反应）：
10 μL 2× SG Buffer
0.5 μL UH Enzyme Mix
1 μL 模板RNA
8.5 μL RNase-free H₂O
程序设置：
反转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 5分钟 → PCR扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环） → 熔解曲线分析。
注意事项
操作需在无核酸污染环境下进行，建议使用带滤芯枪头。
阳性对照仅用于实验质控，不可替代临床样本。
熔解曲线需呈现单一峰，以确认扩增特异性。
应用支持
兼容主流荧光定量PCR仪（含No Rox/Low Rox/High Rox平台）。
提供技术验证数据（如扩增效率≥90%，R²≥0.99）。
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关键字： 梅恩君病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;