肉孢子虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 肉孢子虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Sarcocystis spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4230 |
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对肉孢子虫属（Sarcocystis spp.）的保守基因序列设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现对样本中肉孢子虫核酸的定性和定量检测。
试剂组成
肉孢子虫预混反应液：含SYBR Green荧光染料、dNTPs、耐热DNA聚合酶及缓冲体系（950μL×1管）。
肉孢子虫引物混合液：特异性引物对（100μL×1管）。
阳性质控品：肉孢子虫靶基因片段（1×10^8拷贝/μL，50μL×1管）。
阴性质控品：无核酸酶水（50μL×1管）。
说明书：1份。
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（建议分装使用），有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等。
自备耗材与设备
无核酸酶PCR管（0.2mL）、吸头（10/200/1000μL）。
离心机、涡旋振荡器、微量移液器。
生物安全柜（推荐用于样本处理）。
样本要求
样本类型：粪便、肌肉组织或血液样本（具体采集方法需符合《临床微生物样本采集规范》）。
保存与运输：短期（<7天）可保存于-20℃，长期需-70℃以下；运输时使用2~8℃冰袋，避免反复冻融。
操作步骤
样本核酸提取：按标准方法提取样本DNA，建议使用商业化的核酸提取试剂盒。
反应体系配制（20μL/反应）：
预混反应液 10μL
引物混合液 2μL
模板DNA 2μL
无核酸酶水 6μL
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
结果分析：根据扩增曲线和Ct值判定样本阴阳性，定量需使用标准品绘制标准曲线。
注意事项
实验分区操作（样本处理、试剂配制、扩增检测），避免交叉污染。
反应液避光保存，避免荧光淬灭。
阳性质控品需单独存放，防止污染其他组分。
废弃物需按生物安全规范处理（如10%次氯酸消毒）。
质量控制
阴性质控品：应无扩增信号（Ct值≥40）。
阳性质控品：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型。
产品用途
本试剂盒适用于科研领域肉孢子虫感染的检测，不用于临床诊断。
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