预期用途
本试剂盒用于定性检测人全血、血清或蜱虫样本中的查菲艾利希体（E. chaffeensis）特异性DNA片段。适用于：
人粒细胞埃立克体病（HGE）的辅助诊断
蜱媒病原体监测及流行病学研究
注意： 检测结果需结合临床症状及其他医学检查综合判断。
产品名称 | 查菲艾利希体（查菲埃立克体）染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Ehrlichia chaffeensis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4118 |
检测原理
采用 TaqMan 探针法荧光定量PCR技术：
特异性引物：靶向查菲艾利克体16S rRNA基因保守区域。
FAM标记探针：与扩增产物结合，释放荧光信号。
实时监测：通过荧光阈值循环数（Ct值）判定样本中病原体载量。
试剂盒组分
| 组分名称 | 48测试/盒 | 保存条件 |
| qPCR Master Mix | 1.2 mL | -20℃ |
| E. chaffeensis 引物探针混合液 | 120 μL | -20℃ |
| DNA 提取试剂（磁珠法） | 1套 | 室温 |
| 阳性对照（灭活E. chaffeensis DNA） | 100 μL | -20℃ |
| 阴性对照（无核酸水） | 1 mL | -20℃ |
| RNase-Free Water | 1 mL | 室温 |
适用仪器
ABI 7500 / QuantStudio 5
Bio-Rad CFX96
Roche LightCycler 480
其他支持FAM通道的qPCR仪
检测流程
1. 样本前处理
血液/血清：使用配套DNA提取试剂盒提取核酸。
蜱虫样本：机械研磨后提取DNA。
2. qPCR反应体系（20 μL/反应）
| 组分 | 体积 |
| qPCR Master Mix | 10 μL |
| 引物探针混合液 | 2 μL |
| 模板DNA | 5 μL |
| RNase-Free Water | 3 μL |
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 45 sec | |
| 荧光采集 | 60℃ | 采集 | |
结果判读
| 结果类型 | Ct值范围 | 判定标准 |
| 阳性 | Ct ≤ 35.0 | 有明显S型扩增曲线 |
| 可疑 | 35.0 < Ct ≤ 38.0 | 重复检测确认 |
| 阴性 | Ct > 38.0 或无Ct值 | 无扩增曲线 |
质控要求：
阳性对照：Ct ≤ 30.0
阴性对照：无扩增（Ct = Undetermined）
性能参数
灵敏度：检出限（LOD）为 10 copies/μL
特异性：
不交叉反应：腺热埃立克体（E. sennetsu）、嗜吞噬细胞无形体（A. phagocytophilum）
可识别查菲艾利克体所有已知亚型
精密度：批内/批间CV < 5%
注意事项
试剂开封后避免反复冻融（≤3次）。
操作全程需在无菌环境下进行，防止气溶胶污染。
阳性对照含灭活病原DNA，按生物安全二级（BSL-2）处理。
本试剂仅用于科研，临床诊断需取得国家药监局注册证。
储存与运输
储存：-20℃避光保存（有效期12个月）
运输：干冰或冰袋（-15℃以下）
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