产品概述

本试剂盒基于荧光定量PCR技术,专用于兔痘病毒核酸的高灵敏度、高特异性检测。适用于科研领域,可进行定性和定量分析,检测线性范围覆盖5个数量级。
产品名称 | 兔痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Rabbitpox Virus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4168 |

产品组成

反应组分:预混PCR缓冲液、引物、探针(或染料)、dNTPs、DNA聚合酶等。
对照品:阳性对照(无传染性DNA片段,浓度1×10^8拷贝/μL),阴性对照。
辅助试剂:模板稀释液(需自备RNA提取试剂)。
操作步骤

样本准备
提取待测样本RNA,避免降解。
标准曲线制备(定量检测需选做)
将阳性对照按10倍梯度稀释(10^2–10^7拷贝/μL),独立分区操作以防污染。
反应体系配制
按20μL体系配制:加入模板RNA、预混反应液、引物/探针,避光操作。
PCR扩增
按以下程序运行:
逆转录(如适用):50℃ 10分钟
预变性:95℃ 3分钟
循环阶段(40–45轮):95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(采集荧光信号)。
数据分析
通过阈值循环数(Ct值)计算病毒拷贝数,标准曲线需R²≥0.99。
注意事项

分区操作:样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行,防止交叉污染。
质量控制:每批次实验需包含阴/阳性对照,排除假阴性或污染。
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融;反应液需短暂离心后使用。
生物安全:实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面,废弃物按生物危害物处理。
性能参数

灵敏度:最低检测限≤10拷贝/μL。
特异性:引物针对兔痘病毒保守区设计,无交叉反应。
稳定性:有效期12个月,运输需低温。
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