跳跃病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用SYBR Green I染料法荧光定量RT-PCR技术，专为跳跃病病毒（Louping Ill Virus）RNA检测设计。通过优化的一步法反应体系，实现反转录（RT）与实时定量PCR（qPCR）在同一反应管内完成，减少操作步骤，降低污染风险。试剂盒包含高灵敏度酶预混液，可检测低至0.1 pg的病毒RNA，适用于临床样本、环境监测及科研分析。

产品组分

| 组分编号 | 组分名称 | 规格（20 T） | 规格（200 T） |

| A | 2× RT-qPCR Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |

| B | 耐热逆转录酶 & HotStart Taq Mix | 20 μL | 200 μL |

| C | RNase-free H₂O | 250 μL | 2×1.25 mL |

| D | 跳跃病病毒阳性对照（非传染性DNA片段） | 50 μL | 50 μL |

技术参数

灵敏度：可检测0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或单拷贝DNA。

特异性：引物针对跳跃病病毒高度保守区设计，无交叉反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

稳定性：预混液在4℃下可保存24小时，性能无显著变化。

操作步骤

标准曲线制备（以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例）：

标记6管，分别加入45 μL稀释液，梯度稀释阳性对照（初始浓度10⁸拷贝/μL）。

涡旋混匀后冰上保存，避免污染。

反应体系配制（20 μL/反应）：

10 μL 2× Buffer + 0.5 μL酶预混液 + 1 μL引物（10 μM） + 2 μL模板RNA + 6.5 μL H₂O。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 5分钟 → PCR循环（95℃ 10秒，60℃ 30秒，40次）。

注意事项

操作需在独立洁净区域进行，避免气溶胶污染。

阳性对照为非传染性片段，不可用于活病毒培养。

本产品仅限科研使用，临床诊断需经额外验证。

应用案例

动物组织检测：成功用于绵羊脑组织样本中跳跃病病毒载量分析，熔解曲线单一。

灵敏度验证：对10⁰~10⁴ TCID₅₀/mL病毒培养液检测，Ct值与滴度呈线性相关（R²>0.99）。

存储与运输

保存条件：-20℃避光，有效期12个月。

运输方式：冰袋低温配送。

公司正在出售的产品