预期用途
本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，适用于猪生殖与呼吸综合症病毒（包括美洲型经典株、高致病性变异株及类NADC-30株）RNA的定性检测，为PRRSV感染的科研辅助诊断提供参考，不可用于临床治疗或诊断。
产品名称 | 猪生殖与呼吸综合症病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4189 |
技术特点
高灵敏度：引物针对病毒保守区域设计，检测限低至10^2拷贝/μL。
广谱性：可检测PRRSV美洲型经典株、高致病株及类NADC-30株。
快速便捷：采用一步法RT-PCR，反应时间缩短至90分钟内。
防污染设计：含dUTP/UNG酶体系，降低假阳性风险。
稳定性：-20℃避光保存有效期12个月，反复冻融≤7次。
组分清单
RT-PCR反应液（含SYBR Green染料、dNTPs、缓冲液）
逆转录酶/热启动Taq酶混合液
阳性对照（人工合成RNA标准品）
阴性对照（DEPC水）
使用说明书
操作流程
1. 样本处理
使用商品化RNA提取试剂盒提取样本RNA，建议-70℃保存备用。
2. 反应体系配制（20μL/管）
| 组分 | 体积 |
| RT-PCR反应液 | 19μL |
| 酶混合液 | 1μL |
| 样本RNA | 5μL |
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 50℃ | 15min | 1 |
| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15s | 40 |
| | 60℃ | 30s | |
| 熔解曲线 | 95℃→60℃| 按仪器要求设置 |
结果判读
阳性：Ct值≤35，且熔解曲线峰值与阳性对照一致。
可疑：35<Ct值<40，建议重复检测。
阴性：无扩增曲线或Ct值≥40。
注意事项
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免交叉污染。
阳性对照需与样本分开存放，防止气溶胶污染。
熔解曲线分析需排除引物二聚体干扰。
储存与运输
-20℃避光保存，运输需干冰条件。
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