产品概述
小孢子酒曲菌染料法荧光定量PCR试剂盒是专为小孢子酒曲菌（Rhizopus microspous）检测打造的科研级检测工具，基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术开发，具有操作便捷、特异性强、灵敏度高的显著优势。试剂盒采用即开即用设计，仅需提供样品DNA模板即可开展实验，既能实现定性阴阳性判断，也能完成病毒载量的精准定量，适用于食品微生物检测、环境微生物监测及疾病诊断等科研场景。
产品名称 | 小孢子酒曲菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Aspergillus microsporus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4228 |
试剂盒组成
本试剂盒为即用型预混体系，包含以下成分：
2×荧光定量PCR预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液及荧光染料（如SYBR Green I）。
阳性对照：小孢子酒曲菌标准DNA模板（定量检测时需使用）。
阴性对照：无核酸酶水（用于排除污染）。
荧光染料特性
游离态吸收峰：471 nm
DNA结合态吸收峰：500 nm
发射光谱：530 nm
信号采集步骤：建议在复性或延伸阶段进行。
操作流程
样本制备：
提取待测样本DNA（推荐使用柱式或一管式核酸提取试剂）。
若检测RNA病毒，需先通过逆转录合成cDNA（参见RT反应体系说明）。
反应体系配制（以20 μL为例）：
预混液10 μL + 引物各0.5 μL + 模板DNA 2 μL + 无核酸酶水补至20 μL。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析（可选）：60℃~95℃，每0.5℃升温1次。
结果分析
定量检测：
以阳性对照Ct值（log浓度）绘制标准曲线，计算待测样本浓度。
定性检测：
阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30且扩增曲线典型；
样本判定：Ct≤35为阳性，Ct≥40为阴性，35<Ct<40需复测。
注意事项
避免试剂污染，操作时使用无核酸酶耗材。
荧光染料对光敏感，需避光保存及操作。
熔解曲线分析可验证扩增特异性（单一峰为理想结果）。
性能指标
特异性：100%（针对小孢子酒曲菌靶序列）；
灵敏度：可检测单拷贝DNA分子；
重现性：批内/批间变异系数≤5%。
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