预期用途
用于科研领域，检测样品中油菜源性成分的核酸，支持定性和定量分析。
产品名称 | 油菜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Rapeseed-derived Component Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4828 |
核心特点
即开即用：用户仅需提供核酸模板，预混优化引物、探针及反应体系。
高灵敏度与特异性：针对油菜源性成分保守序列设计探针，避免交叉反应。
双重检测功能：
定性检测：通过Ct值判定阳性/阴性（Ct≤36为阳性，≥40为阴性）。
定量检测：标准曲线覆盖5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL），线性关系可靠。
内置对照：含无传染性DNA片段作为阳性对照，区分假阴性。
操作流程
标准曲线制备（定量检测需用）
标记6管，依次加入45μL稀释液，从阳性对照（10^7拷贝/μL）起始梯度稀释（10倍递减），获得10^6–10^1拷贝/μL系列浓度。
独立操作区完成，使用带滤芯枪头避免污染。
样本核酸提取
推荐配套RNA提取试剂（如柱式病毒RNAout），或兼容其他商业试剂盒。
设置阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。
荧光定量PCR反应
体系配置（20μL/反应）：
模板DNA 5μL
预混PCR Master Mix 10μL
引物/探针混合液 5μL
扩增程序：
95℃ 5min（预变性）
95℃ 15s → 60℃ 1min（40循环，荧光采集）
结果判读
定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本拷贝数。
定性分析：
阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤36且扩增曲线正常。
样本Ct≤36判为阳性；≥40为阴性；36–40需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，防止污染。
试剂处理：使用前充分离心混匀，避光保存；避免反复冻融（≤3次）。
实验安全：
穿戴一次性防护用具，实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。
运输与储存：
低温运输（泡沫箱加冰），-20℃保存；阳性对照单独存放。
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关键字： 油菜源性成分;染料法荧光定量;PCR试剂盒;