产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专为大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）的核酸定量检测设计，适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物-探针组合、阳性对照及反应体系，可实现高灵敏度（检测下限达10拷贝/μL）和高特异性（避免与其他物种DNA交叉反应）的检测。
产品名称 | 大鼠脑源性神经营养因子探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Rat Brain-derived Neurotrophic Factor (BDNF) Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4843 |
包装组分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | qPCR缓冲液 | 500 μL |
| 试剂二 | qPCR酶混合液 | 50 μL |
| 试剂三 | 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |
| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |
| 试剂五 | 阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL |
操作步骤
1. 标准曲线制备（定量检测适用）
稀释阳性对照：以10倍梯度稀释阳性对照（10^1–10^6拷贝/μL），独立操作避免污染。
标记离心管：依次标记6管（6至1号），每管加入45 μL稀释液，逐级稀释5 μL阳性对照，涡旋混匀后冰上保存。
2. 样本DNA制备
使用兼容的DNA提取试剂盒纯化样本，建议设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。
3. qPCR反应体系（20 μL）
体系配置：按N+9管配置（N样本+2对照+6标准曲线+1阴性对照）。
加样顺序：依次加入缓冲液、酶混合液、引物-探针、模板DNA（2 μL/管）。
4. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 10 min |
| 预变性 | 95℃ | 10 min |
| 循环扩增 | 95℃ | 15 sec |
| （40循环） | 60℃ | 60 sec（采集FAM信号） |
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性检测：
阳性：Ct ≤ 39，扩增曲线典型；
阴性：Ct ≥ 40或无扩增；
灰区（39<Ct<40）：需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域完成，避免交叉污染。
保存条件：试剂-20℃保存，避免反复冻融；运输需使用冰袋（2–8℃）。
质量控制：
阴性对照Ct值应≥40；
阳性对照Ct值≤30且曲线呈S型。
局限性：
样本质量、提取方法及运输条件可能影响结果；
基因突变可能导致假阴性。
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关键字： 大鼠脑源性神经营养因子;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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