产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，适用于病毒核酸的定性与定量检测。采用优化设计的引物和探针，具有高灵敏度和特异性，可有效避免与其他病原体的交叉反应。试剂盒包含预混缓冲液、酶混合物、阳性对照及专用稀释液，支持50次20μL体系的检测反应，仅限科研使用。
产品名称 | 病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Universal Virus Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4844 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品核酸模板（DNA或RNA）。
高灵敏性：引物和探针针对病毒保守序列优化，检测下限可达10^1拷贝/μL。
双重检测模式：支持定性与定量分析，定量线性范围覆盖5个数量级。
内控设计：提供无传染性阳性对照片段，便于区分假阴性结果。
兼容性：与主流核酸提取试剂盒兼容，可搭配柱式提取或免提取释放剂使用。
操作流程
（一）标准曲线制备（定量分析适用）
标记6支离心管（6至1号），每管加入45μL专用模板稀释液。
依次梯度稀释阳性对照（10^7拷贝/μL起始），每次稀释后震荡混匀，获得10^6至10^1拷贝/μL的标准品系列。
注：稀释操作需在独立区域进行，避免交叉污染。
（二）样品核酸提取
建议设置N+2个样本（含阴性对照NC与阳性对照PC）。
使用自选方法提取核酸，或搭配推荐提取试剂盒。
（三）PCR反应体系配制
按以下比例配制20μL反应体系（以定量分析为例）：
探针法qPCR缓冲液：10μL
酶混合液：2μL
探针及引物混合液：各1μL/2μL
模板：5μL（样品/标准品/阴性对照）
离心后立即上机。
（四）扩增程序
逆转录（如为RNA病毒）：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
扩增循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）
数据分析
定量检测：以标准品log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制曲线，计算样品浓度。
定性判定：
阳性：Ct值≤36（或39，依试剂盒型号），扩增曲线呈S型。
阴性：Ct值≥40或无扩增。
灰区（36-40）：需复检确认。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制及扩增需在不同区域进行。
污染控制：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸或75%乙醇清洁台面。
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融，保质期12个月。
局限性：检测结果受样本质量、提取效率及病原体变异等因素影响。
包装清单
qPCR缓冲液（500μL）
酶混合液（50μL）
引物-探针干粉（50T）
阳性对照（50μL, 10^7拷贝/μL）
模板稀释液（1mL）
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