产品概述
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，专用于检测人类内源性逆转录病毒（HERV）的RNA。通过特异性引物和探针设计，实现高灵敏度、高特异性的核酸扩增检测，适用于科研领域（不可用于临床诊断）。
产品名称 | 人类内源性逆转录病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Human Endogenous Retrovirus Probe-based Fluorescent Quantitative RT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4870 |
规格与成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| 试剂二 | qRT-PCR酶混合液 | 100μL |
| 试剂三 | 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |
| 试剂四 | HERV特异性引物混合液 | 100μL |
| 试剂五 | HERV探针 | 50μL |
| 试剂六 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）| 50μL |
| 其他 | 说明书 | 1份 |
注：
自备试剂：样品RNA、无核酸酶离心管/吸头等耗材。
不同批号组分不可混用。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输：低温（≤8℃）密封运输，避免反复冻融。
实验步骤
1. 标准曲线制备（6个梯度稀释）
标记离心管（7-2号），每管加45μL稀释液。
7号管加入5μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀得1×10⁷拷贝/μL标准品。
依次稀释至2号管（1×10²拷贝/μL），冰上保存备用。
2. 样品RNA制备
建议设置阳性（PC）和阴性对照（NC）。
使用兼容的RNA提取试剂盒纯化样本，避免DNA污染。
3. qRT-PCR反应（20μL体系）
| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |
| qRT-PCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 探针 | 1μL | 1μL | 1μL |
| 引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 模板RNA/标准品/水 | 5μL | 5μL水 | 5μL标准品 |
反应程序：
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM信号）
数据分析
定量检测：以标准品log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制曲线，计算样本浓度。
定性检测：阴性对照Ct值≥40方可判读，阳性样本Ct值低于阈值。
注意事项
操作需在独立区域进行，避免交叉污染。
阳性对照为无传染性DNA片段，不可替代活体样本。
试剂解冻后需充分混匀，分装避免反复冻融。
声明
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。实验需符合生物安全规范。
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