木质部难养细菌夹竹桃株探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 木质部难养细菌夹竹桃株探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Xylella fastidiosa Oleander Strain Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4681 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发,专用于检测木质部难养细菌夹竹桃株(Xylella fastidiosa oleander strain)的核酸。适用于科研领域的定性或定量分析,具有高灵敏度和特异性,操作便捷,即开即用。
规格:50次/盒(20μL体系/次)
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输方式:泡沫箱加冰密封运输,确保低温环境。
试剂盒特点
即开即用:仅需提供样品核酸模板(DNA或RNA)。
高灵敏度:优化引物及探针设计,检测限低至10拷贝/μL。
双重对照:含无传染性DNA阳性对照及阴性对照,避免假阴性干扰。
广谱兼容性:支持多种核酸提取方法(如柱式提取或免提取试剂)。
多功能检测:
定性分析:通过Ct值判定阴阳性(Ct≤36为阳性,≥40为阴性)。
定量分析:标准曲线覆盖5个数量级(10^1–10^6拷贝/μL),线性关系可靠。
操作步骤
标准曲线制备
标记6管,依次加入45 μL稀释液,梯度稀释阳性对照(10^7拷贝/μL起始),获得10^6–10^1拷贝/μL系列浓度。
每次稀释需更换带芯枪头,避免交叉污染。
样品处理
建议设置N+2样本(含阳性/阴性对照)。
自备核酸提取试剂,或选用兼容的柱式病毒RNA提取试剂。
荧光定量PCR
体系配置:按比例混合反应液、引物探针、模板DNA及对照。
程序设置:
预变性:95℃ 3分钟
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(40循环,荧光采集)
数据分析
定量检测:以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴,计算样品浓度。
定性检测:阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤36且呈典型扩增曲线。
注意事项
分区操作:样本处理、试剂配制、PCR扩增需在不同区域进行。
防污染措施:
使用一次性耗材及专用工作服。
实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面及移液器。
质量控制:
反应液避光保存,避免反复冻融。
阳性对照单独存放,防止污染其他组分。
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