玉竹探针法PCR鉴定试剂盒

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于玉竹（Rhizoma polygonati odorati）的快速、高灵敏鉴定。适用于科研领域，不适用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA/RNA模板。

高灵敏性与特异性：引物及探针针对玉竹高度保守区设计，避免与其他微生物核酸交叉反应。

双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。

内置对照：提供无传染性阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于区分假阴性结果。

兼容性：适配多数市售DNA/RNA提取试剂盒。

规格与成分

| 编号 | 成分 | 规格（50次反应） |

| 试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL |

| 试剂二 | 玉竹qPCR引物混合液 | 100 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | 玉竹qPCR探针（FAM标记） | 50 μL |

| 试剂五 | 阳性对照（1×10^8拷贝/μL）| 50 μL |

| 附 件 | 使用说明书 | 1份 |

运输与保存

运输条件：低温运输（-20℃冰袋）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

实验步骤

标准曲线制备（10倍梯度稀释）

标记6管，依次加入45 μL稀释液。

首管加入5 μL阳性对照，震荡混匀得10^7拷贝/μL标准品，依次稀释至10^2拷贝/μL。

样品制备

设置N+2个样本（含阴/阳性对照），推荐使用柱式提取法纯化DNA/RNA。

PCR反应体系（20 μL/管）

| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |

| 2×Probe qPCR MagicMix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |

| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 探针 | 1 μL | 1 μL | 1 μL |

| 模板DNA/RNA | 7 μL | — | — |

| 超纯水 | — | 7 μL | — |

| 标准品 | — | — | 7 μL |

PCR程序

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min |

| 40循环（扩增） | 95℃ | 15 sec |

| | 60℃ | 1 min（采集荧光） |

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：

阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤35（35–40需复测）。

阳性对照需Ct≤30且扩增曲线典型。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需独立区域，避免污染。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。

废弃物处理：实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面及器材。

局限性：结果受样本保存、提取效率及病原体变异影响，需结合其他检测方法验证。

声明：本产品仅限科研使用。

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