产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于郁金（Radix curcumae）的快速、高特异性鉴定。采用针对郁金保守基因序列设计的引物和探针，结合优化的预混反应体系（含Taq酶、dNTPs、缓冲液等），可实现高灵敏度（检测限达10^3拷贝/μL）和精准定量（线性范围覆盖5个数量级）。适用于科研场景下的物种鉴定、基因表达分析及质量控制。
产品名称 | 郁金探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Curcumae Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4919 |
试剂盒组成
| 成分 | 规格/数量 | 用途说明 |
| 2× qPCR MasterMix | 1 mL（含探针染料） | 预混反应液，含酶及缓冲体系 |
| 郁金引物探针混合液 | 100 μL | 特异性扩增目标序列 |
| 阳性对照（10^8拷贝/μL） | 50 μL | 标准曲线建立及质控 |
| 无核酸酶水 | 1 mL | 反应体系稀释 |
| 核酸释放剂（试用装）| 20次用量 | 辅助样本核酸提取 |
实验步骤
1. 样本制备
DNA提取：推荐使用柱式提取试剂盒或试剂盒提供的核酸释放剂，避免交叉污染。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释阳性对照（10^7–10^2拷贝/μL），用于标准曲线绘制。
2. qPCR反应体系配制（20μL体系）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× MasterMix | 10 |
| 引物探针混合液 | 0.8 |
| 模板DNA | 2–5 |
| 无核酸酶水 | 补足至20 |
3. 反应程序
| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃, 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃, 15 s | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃, 30 s | |
4. 数据分析
定量检测：以阳性对照Ct值绘制标准曲线，计算样本拷贝数。
定性判定：阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤36；样本Ct≤36判为阳性，≥40为阴性，36–40需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免气溶胶污染。
质控要求：每批次实验需包含阴性对照（无模板）和阳性对照。
探针避光：MasterMix含荧光探针，需避光保存及操作。
适用范围：仅限科研使用，不适用于临床诊断。
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