金钱白花蛇探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 金钱白花蛇探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Bungarus multicinctus Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4809 |
产品基本信息
规格:50T(50次20μL体系反应)
保存条件:-20℃避光保存,低温运输,有效期12个月。
用途:仅限科研使用,不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用:用户仅需提供样品RNA/DNA模板,无需额外优化引物或探针。
高灵敏度与特异性:引物及探针针对金钱白花蛇高度保守序列设计,避免与其他病毒/生物样本交叉反应。
内置对照:提供阳性对照(1×10^8拷贝/μL),便于区分假阴性结果。
兼容性:适用于多种样本类型(血液、粪便、病灶组织等),与主流核酸提取试剂盒兼容。
双重检测模式:支持定性与定量分析,定量线性范围达5个数量级(10^2~10^7拷贝/μL)。
实验操作流程
(一)样本准备
DNA/RNA提取:按标准方法提取样本核酸,建议使用带芯枪头避免污染。
阳性对照稀释(标准曲线制备):
按10倍梯度稀释阳性对照(10^8拷贝/μL)至6个浓度(10^7~10^2拷贝/μL),独立操作以防污染。
(二)试剂配制
每反应体系20μL,需配制N+8管(待测样本+阴性对照+6个阳性梯度)。
避光条件下将预混液分装至qPCR管。
(三)加样与扩增
加入2μL模板(顺序:阴性对照→待测样本→阳性对照)。
离心30秒后上机,扩增程序:95℃预变性2分钟;40个循环(95℃ 15秒→60℃ 60秒,采集荧光信号)。
(四)结果判读
定量分析:以Ct值与阳性对照log浓度绘制标准曲线,计算样本拷贝数。
定性分析:
阳性:Ct值<35,S型扩增曲线;
阴性:Ct值>38或无Ct值;
可疑(35≤Ct≤38):需复检确认。
注意事项
分区操作:严格分离样本制备、试剂配制及扩增区域,避免交叉污染。
质量控制:每次实验需包含阴/阳性对照,反应液避光保存,彻底混匀后离心。
安全防护:使用一次性耗材,实验后以10%次氯酸或75%乙醇消毒台面及仪器。
存储要求:组分-20℃保存,避免反复冻融;阳性对照单独存放。
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