马铃薯源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 马铃薯源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Potato-derived Component Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4813 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术,专用于检测样品中马铃薯(Solanum tuberosum)源性成分的核酸。通过特异性引物和探针设计,结合实时荧光信号监测,实现高灵敏度、高特异性的定性和定量分析,适用于食品、加工制品及科研样本的检测。
产品组成
探针法qRT-PCR缓冲液(500 μL)
探针法qRT-PCR酶混合液(50 μL)
荧光PCR专用模板稀释液(1 mL)
PCR引物-探针干粉(50次反应)
PCR阳性对照(10^7拷贝/μL,50 μL)
技术参数
检测方法:探针法荧光定量PCR(TaqMan探针)
检测范围:定性及定量(线性范围≥5个数量级)
反应体系:20 μL/反应,共50次检测
灵敏度:可检测低至10拷贝/μL的靶标核酸
特异性:与常见微生物及植物源性成分无交叉反应
操作流程
1. 标准曲线制备(定量检测需执行)
使用阳性对照进行10倍梯度稀释(10^6~10^1拷贝/μL),独立操作避免污染。
2. 样本DNA提取
推荐使用商业化DNA提取试剂盒,需设置阴/阳性对照。
3. PCR反应设置
按比例混合试剂,加入模板DNA,设置扩增程序:
逆转录:50℃ 10 min(如需)
预变性:95℃ 10 min
扩增循环:95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec(40循环,FAM通道采集信号)
4. 数据分析
定量分析:以标准曲线计算样本拷贝数。
定性分析:Ct≤39为阳性,Ct≥40为阴性,39<Ct<40需复测。
样本要求与保存
样本类型:食品、加工品、原料等。
保存条件:短期-20℃,长期-70℃(避免反复冻融>3次);运输需2~8℃冰袋。
注意事项
分区操作(样本处理、试剂配制、扩增),避免交叉污染。
使用带滤芯吸头,实验后彻底清洁台面(10%次氯酸或75%乙醇)。
试剂解冻后需涡旋混匀并离心,避光保存。
阳性对照需独立稀释区操作,防止气溶胶污染。
局限性
检测结果受样本质量、提取效率及操作规范影响。
基因突变或重组可能导致假阴性;污染可能导致假阳性。
有效期与储存
有效期:12个月(-20℃避光保存)。
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