预期用途

用于野菊花核酸的体外定性检测,适用于科研用途,不适用于临床诊断。
产品名称 | 野菊花探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Flos Chrysanthemi Indici Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4926 |

检验原理

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术,针对野菊花基因保守区域设计特异性引物及探针。在PCR扩增过程中,探针与目标序列结合后释放荧光信号,通过荧光定量PCR仪实时监测信号强度,实现核酸的定性与定量分析。
试剂组成

| 组分名称 | 规格/数量 |
| 野菊花扩增液 | 25 μL × 1管 |
| 野菊花反应液 | 975 μL × 1管 |
| 阳性质控品(合成DNA) | 50 μL × 1管 |
| 阴性质控品 | 50 μL × 1管 |
| 说明书 | 1份 |
注意:不同批号组分不可混用,试剂盒内组分可满足标称检测次数。
储存条件与有效期
储存条件:-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(建议冻融次数<7次)。
有效期:12个月。
适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI系列(如7500、StepOnePlus)
Bio-Rad(CFX系列)
Roche LightCycler
Eppendorf Mastercycler
MX3000P/3005P
自备耗材:无DNA/RNA酶的离心管、PCR反应管、滤芯吸头(10/200/1000 μL)、移液器及离心机等。
样本要求
样本类型:全血、血清、组织、拭子、病毒培养物等。
保存与运输:短期保存于-20℃,长期需-70℃;运输时使用2~8℃冰袋,避免反复冻融。
核酸提取建议:推荐采用商品化DNA提取试剂盒(如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒)。
操作步骤

样本处理
按规范提取样本DNA,建议提取后立即检测或-15℃以下保存。
试剂配制
解冻试剂后混匀离心,按N(样本数+阴阳性对照)配制反应体系:
野菊花反应液:19.5 μL/管
野菊花扩增液:0.5 μL/管
分装至PCR管,加入5 μL模板DNA或对照品。
PCR扩增
设置反应参数:
预变性:95℃ 2分钟
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 60秒(40循环)
荧光通道:FAM检测,无淬灭通道。
性能参数

特异性:与近缘物种无交叉反应。
灵敏度:检测下限达10~100拷贝/反应。
防污染设计:含dUTP/UNG酶系统(部分型号)。
注意事项

实验需分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),避免污染。
阳性对照为人工合成DNA片段,不可用于活体实验。
结果判读需结合阴阳性对照,异常扩增曲线需重复检测。
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关键字: 野菊花;探针法;PCR鉴定试剂盒;