商品属性
产品名称 | 甲醛脱氢酶（FDH）测试盒 | 产品货号 | BH-961113 |
规格 | 100管/96样、50管/48样 | 产品分类 | 辅酶Ⅰ系列 |
测试方法 | 微量法、紫外分光光度法 | 用途 | 仅供科研实验 |
测定意义与原理
测定意义
甲醛脱氢酶（FDH，EC1.2.1.46）是甲醛解毒途径的关键酶，主要功能包括：甲醛解毒：催化甲醛氧化为甲酸，是生物体内甲醛代谢的核心步骤环境适应：帮助微生物在甲醛污染环境中生存，具有生物修复潜力工业应用：用于甲醛生物传感器、生物催化合成等领域病理关联：FDH活性异常与甲醛中毒、神经系统疾病等相关
测定原理
FDH催化甲醛与NAD+反应生成NADH，反应式如下： 甲醛+NAD++H2O→FDH甲酸+NADH+H+甲醛+NAD++H2OFDH甲酸+NADH+H+ NADH在340nm处有特征吸收峰，通过监测吸光度变化计算酶活性。
自备仪器与试剂
必备仪器
紫外分光光度计/酶标仪（具备340nm检测通道）
台式高速离心机（最大转速≥12000g）
恒温水浴锅（控温精度±0.5℃）
可调式移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）
超声破碎仪（用于细胞/细菌样本处理）
必备耗材
1mL石英比色皿/96孔紫外板
离心管（1.5mL、10mL）
一次性吸头（无菌无酶）
研钵/组织匀浆器（冰浴专用）
自备试剂
蒸馏水/去离子水
生理盐水（用于样本稀释）
液氮（用于样本速冻保存）
样本前处理方法
组织样本（动植物）新鲜样本取材后立即液氮速冻，-80℃保存；避免反复冻融称取0.05-0.1g组织，按1:5-10（W/V）比例加入预冷提取液冰浴匀浆（转速1000-1500rpm，时间5-10min）转移至离心管，12000g 4℃离心15min，取上清液置冰上待测若酶活性过高，可用提取液稀释后测定（建议稀释倍数1-10倍）
细胞/细菌样本收集对数生长期细胞（密度1×10^6/mL）或细菌（OD600=0.6-0.8）8000g 4℃离心5min，弃上清，用生理盐水洗涤2次按500万细胞/细菌加入1mL提取液的比例重悬冰浴超声破碎（功率30%，超声5s，间隔10s，重复20次）12000g 4℃离心10min，取上清液置冰上待测
环境样本（土壤、水体）土壤样本：称取1g新鲜土壤，加入5mL提取液，震荡提取30min水体样本：直接取上清液，若浑浊需3000g离心5min后取上清环境样本需过滤去除杂质，避免干扰吸光度测定
测定操作步骤
紫外分光光度法流程
试剂准备：
从4℃取出试剂盒，室温平衡20min
冻干粉试剂：临用前按说明书加入蒸馏水溶解
试剂工作液：按比例混合试剂A、B，现配现用
空白管设置：
取比色皿，依次加入：提取液900μL + NAD+溶液50μL + 蒸馏水50μL
37℃预温育5min，记录340nm处初始吸光度A0
样本测定：
另取比色皿，依次加入：提取液900μL + NAD+溶液50μL + 样本50μL
37℃预温育5min，加入底物溶液20μL立即混匀
连续记录1min（A1）和2min（A2）时的吸光度值
计算ΔA：ΔA = (A2 - A1) （吸光度每分钟增加量）
微量法（酶标仪）流程96孔板每孔加入：提取液90μL + NAD+溶液5μL + 样本5μL37℃预温育5min，加入底物溶液2μL立即混匀设置动力学模式，340nm处连续读取10个循环（每1min读取1次）计算吸光度增加速率（ΔA/min）
酶活力计算方法
单位定义
U/mL：每mL样本每分钟生成1μmol NADH的酶量
U/mgprot：每mg组织蛋白每分钟生成1μmol NADH的酶量
U/g鲜重：每g组织鲜重每分钟生成1μmol NADH的酶量
计算公式
FDH活性=ΔA×V反总×V样总ε×d×V样测×T×CFDH活性=ε×d×V样测×T×CΔA×V反总×V样总
ΔA：吸光度变化值（A2 - A1）
V反总：反应体系总体积（1.0mL）
V样总：样本提取液总体积（mL）
ε：NADH摩尔消光系数（6.22×10³ L/(mol·cm)）
d：比色皿光径（1cm）
V样测：测定时加入的样本体积（0.05mL）
T：反应时间（1min）
C：样本浓度（蛋白浓度mg/mL、组织鲜重g/mL）
简化公式
血清/血浆样本：FDH（U/mL）= 3.22 × ΔA
组织样本（蛋白浓度）：FDH（U/mgprot）= 3.22 × ΔA ÷ Cpr
组织样本（鲜重）：FDH（U/g鲜重）= 3.22 × ΔA ÷ W
注意事项
样本处理：
样本需新鲜制备，避免甲醛挥发；密封冷藏可保存24h
甲醛对酶有抑制作用，样本处理时需避免外源甲醛污染
环境样本需去除杂质，避免干扰吸光度测定
试剂使用：
NAD+溶液对光敏感，配制后需避光保存，24小时内用完
冻干粉试剂需现配现用，避免反复冻融
不同批号试剂禁止混用，需重新绘制标准曲线
测定过程：
反应温度需严格控制在37℃（酶促法最适温度）
若ΔA值超出标准曲线范围，需调整稀释倍数重新测定
每个样本需设置平行实验，结果取平均值
质量控制：
每次实验需设置空白对照（蒸馏水替代样本）和质控样本
若结果偏差较大，需检查试剂是否失效或样本处理是否正确
公司正在出售的产品
解整合su样金属蛋白15检测试剂盒 ADAM15 ELISA Kit | B16-F10+LUC小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记 |
人褪黑suELISA试剂盒 | 人原代扁桃体动脉平滑肌细胞 |
人甘油三酯ELISA试剂盒 | 人扁桃体动脉平滑肌细胞 |
人肝配蛋白B3ELISA试剂盒 | 人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17(STR鉴定正确) |
人肝su辅因子ⅡELISA试剂盒 | A172 (人胶质母细胞瘤细胞) (STR鉴定正确) |
人肝su结合性表皮生长因子ELISA试剂盒 | 人肺动脉平滑肌细胞 |
人肝细胞生长因子ELISA试剂盒 | 人肺癌细胞 |
人蛙皮suELISA试剂盒 | 兔肝间质细胞永生化 |
人肝脂ELISA试剂盒 | 大鼠内皮祖细胞 |
人胰岛su降解ELISA试剂盒 | NCI-H647 (人肺癌细胞) (STR鉴定正确) |
人干扰su调节因子4ELISA试剂盒 | 95-D人高转移肺癌细胞 |
人干扰su调节因子5ELISA试剂盒 | 293FT人胚肾细胞专用培养基 |
人干扰su诱导T细胞趋化因子ELISA试剂盒 | 甲醛脱氢酶（FDH）测试盒NCI-H2126 人肺癌细胞 |
人干扰su诱导蛋白10ELISA试剂盒 | 人原代附睾管上皮细胞 |
人干细胞因子ELISA试剂盒 | 小鼠黑色素瘤带荧光素酶B16-F10+luc（种属鉴定） |
解整合su样金属蛋白15检测试剂盒 ADAM15 ELISA Kit | B16-F10+LUC小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记 |
人褪黑suELISA试剂盒 | 人原代扁桃体动脉平滑肌细胞 |
人甘油三酯ELISA试剂盒 | 人扁桃体动脉平滑肌细胞 |
人肝配蛋白B3ELISA试剂盒 | 人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17(STR鉴定正确) |
关键字： 甲醛脱氢酶;FDH;测试盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！