产品介绍:
转基因植物CamV35S启动子核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种基于TaqMan探针技术的高特异性检测工具,通过实时监测荧光信号实现对食品、饲料及农产品中转基因植物成分的精准鉴定。该试剂盒以花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)为靶标,检出限可达0.1%,广泛应用于食品安全监管、农产品贸易及科研领域,是当前转基因产品检测的核心技术手段之一。
产品名称 | 转基因植物CamV35S启动子核酸检测试剂盒(荧光PCR法) | 货号 | AP3928 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
一、检测原理与技术特点
该试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,针对CaMV35S启动子保守序列设计特异性引物与FAM标记的TaqMan探针。在PCR扩增过程中,当探针与目标DNA序列结合后,聚合酶在延伸时会降解探针,释放出荧光信号,通过实时监测荧光强度变化,可实现对CaMV35S启动子的特异性检测。该方法具有高灵敏度(可检出10³ copies/mL样本)、高特异性(种属特异性达100%)和高重现性(经多批次验证)的特点。部分试剂盒采用优化的反应体系,使得检测灵敏度可达1-10 CFU/mL,远高于传统检测方法。
二、产品性能与规格参数
性能指标 参数说明
检测方法 实时荧光PCR法(TaqMan探针法)
检测限 通常为0.1%(质量分数),部分产品可达10³ copies/mL
特异性 专一性检测CaMV35S启动子,与其他植物基因组无交叉反应
规格 48T/盒、50T/盒(不同品牌规格略有差异)
保存条件 -20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(≤5次)
有效期 6-12个月(不同品牌存在差异)
适用仪器 ABI 7500、CFX 96、Roche LightCycler 480等荧光定量PCR仪
三、操作流程与结果判读
核心操作步骤
样本处理:称取200g植物样本,参照《GB/T 19495.3-2004》提取DNA,短期-20℃保存,长期-70℃保存(≤6个月)
添加模板:在模板添加区(第二区)向每管加入5μL DNA模板,顺序为阴性对照、待测样品、阳性对照
试剂配制:在试剂准备区(第一区)将反应液与酶液按比例混合,分装至PCR反应管,全程置于冰盒中操作
添加模板:在模板添加区(第二区)向每管加入5μL DNA模板,顺序为阴性对照、待测样品、阳性对照
扩增反应:使用荧光定量PCR仪,设置基线循环6-15,阈值设为超过阴性对照扩增曲线最高点35
推荐PCR扩增程序
步骤 循环数 温度 时间
预变性 1 cycle 95℃ 10 min
变性 40 cycles 95℃ 15 sec
退火/延伸 40 cycles 60℃ 60 sec
结果判读标准
阳性:Ct值≤36,扩增曲线呈典型"S"型
阴性:Ct值≥40或无Ct值,曲线为直线或轻微斜线
可疑样品:36<Ct值<40,需重新抽提核酸进行验证
无效检测:阴性对照出现扩增曲线或阳性对照无扩增曲线3
四、应用场景与质量控制
主要应用场景
食品安全监管:检测食品中是否含有未经授权的转基因成分,保障消费者知情权
农产品贸易:满足国际贸易中转基因产品标识要求(如欧盟规定>0.5%需标识)
科研研究:转基因植物安全性评价、基因表达研究及检测方法开发
进出口检验:海关对进出境转基因产品的符合性检测与抽查检测15
质量控制要点
必须设置阴阳性对照:每次实验需包含阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)
严格分区操作:至少分为试剂准备区、样本处理区、模板添加区、扩增区,避免交叉污染
使用无核酸酶耗材:采用带滤芯吸头,不同区域使用独立工具,实验前后用10%次氯酸钠溶液处理工作台
样本保存:避免反复冻融,运输时2-8℃冰袋保存
五、相关标准与注意事项
现行相关标准
GB/T 38505-2020《转基因产品通用检测方法》,规定了核酸提取、目标基因扩增等核心检测环节的操作规范,其方法的最低检出限为0.1%
GB/T 19495.3-2004《转基因产品检测 核酸提取纯化方法》
GB/T 19495.7-2004《转基因产品检测 抽样和制样方法》
公司正在出售的产品:
富含脯氨酸蛋白24抗体 | Folate Receptor 4 叶酸受体4抗体 |
神经突触粘附样分子4抗体 | 整合素α6(CD49f)抗体 |
DCAF12 睾丸癌中心体相关蛋白抗体 | Meningioma 1/MN1 脑膜瘤蛋白1抗体 |
糖类应答元件结合蛋白ChREBP抗体 | 大鼠C组着色性干皮病偶联因子(XPC)PCR检测试剂盒 |
ERMAP 红细胞膜相关蛋白ERMAP抗体 | 人钩端螺旋体IgM(Lebtospira)核酸检测试剂盒 |
human CD64/FITC FITC标记人CD64单克隆抗体 | 大鼠组氨酸丰富糖蛋白(HRG)PCR检测试剂盒 |
端粒调控因子2抗体 | 小鼠精氨酸酶(Arg)PCR检测试剂盒 |
EMG1 EMG1蛋白抗体 | 大鼠甲状腺球蛋白IgG抗体PCR检测试剂盒 |
锌指蛋白43抗体 | 小鼠D-多巴色素变位酶(DDT)PCR检测试剂盒 |
CCL21 淋巴细胞趋化因子CCL21/Exodus 2抗体 | 人C4结合蛋白(C4BP)PCR检测试剂盒 |
β淀粉样蛋白结合蛋白抗体 | 血乙醇ALC测定试剂盒 40ml 乙醇脱氢酶法 |
IKB epsilon, Alexa Flour 680 conjugated AF680标记的KB抑制蛋白激酶ε抗体 | 大鼠单胺氧化酶(MAO)核酸检测试剂盒 |
Kelch样蛋白38抗体 | 兔ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)核酸检测试剂盒 |
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)PCR检测试剂盒 | 转基因植物CamV35S启动子核酸检测试剂盒(荧光PCR法)裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)核酸检测试剂盒 |
大鼠顺乌头酸酶(ACOz)PCR检测试剂盒 | 小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)核酸检测试剂盒 |
人白介素6受体(IL-6R)核酸检测试剂盒 | 猪生长抑素受体5(SSR5)PCR检测试剂盒免费代测 |
注意事项
实验操作规范
严格分区操作:试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离,防止气溶胶污染。
每次实验需设置阴性对照(无模板DNA)、阳性对照(已知PAT基因样本)及空白对照(仅缓冲液)。
加样时避免过量或不足,推荐低容量反应管以提高热传导率。
污染防控
定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染,可通过擦拭采样后扩增验证。
扩增产物需在专用区域处理,避免开盖时形成气溶胶污染。
关键字: 转基因植物CamV35S启动子 ; 荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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